Wilms2

Garis sel Wilms2 berasal dari tumor Wilms primer pada pasien anak dengan mutasi gen WT1. Garis sel ini dicirikan oleh mutasi nonsense homozigot pada gen WT1 (c.1084 C>T, p.R362X), yang menghasilkan produksi protein WT1 yang terpotong dan tidak berfungsi. Hilangnya WT1 fungsional, gen yang penting untuk perkembangan ginjal, merupakan ciri khas subtipe tertentu dari tumor Wilms, terutama yang terkait dengan diferensiasi mesenkim atau stroma. Garis sel Wilms2 adalah model yang signifikan untuk mempelajari proses tumorigenik yang didorong oleh hilangnya WT1, terutama dalam konteks tumor Wilms yang mempertahankan fitur genetik penting lainnya.

Sel Wilms2 juga membawa mutasi pada gen CTNNB1, yang mengkodekan β-Catenin, komponen kunci dari jalur pensinyalan Wnt. Mutasi ini, secara khusus mempengaruhi serin 45, mengarah pada stabilisasi dan akumulasi β-Catenin, menghasilkan aktivasi konstitutif jalur Wnt. Aktivasi ini merupakan pendorong proliferasi sel dan tumorigenesis yang diketahui pada tumor Wilms, menjadikan Wilms2 sebagai model yang berharga untuk memahami bagaimana pensinyalan Wnt yang menyimpang berkontribusi pada perkembangan dan perkembangan tumor dengan mutasi WT1.

Dalam hal fenotipe, sel Wilms2 menunjukkan morfologi seperti mesenkim, mengekspresikan vimentin dan tidak memiliki penanda epitel seperti sitokeratin. Hal ini sesuai dengan karakteristik stroma tumor dan menggarisbawahi peran WT1 dalam mengatur transisi mesenkim-epitel selama perkembangan ginjal. Analisis proteomik Wilms2 telah mengidentifikasi aktivasi beberapa reseptor tirosin kinase (RTK), termasuk PDGFRβ dan AXL, yang diketahui mendukung kelangsungan hidup dan proliferasi sel tumor. Selain itu, jalur hilir seperti MAPK dan PI3K/AKT juga diaktifkan, yang selanjutnya berkontribusi pada sifat ganas sel Wilms2.

Secara keseluruhan, garis sel Wilms2 berfungsi sebagai alat penting untuk mengeksplorasi mekanisme molekuler tumor Wilms yang didorong oleh hilangnya WT1 dan pensinyalan Wnt yang menyimpang. Karakteristik genetik dan fenotipiknya menyediakan platform yang kuat untuk menyelidiki target terapeutik potensial dan untuk memahami peran jalur pensinyalan utama dalam patologi tumor Wilms dengan komponen mesenkim.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami