Wilms10M

Garis sel Wilms10M dibuat dari nodul paru metastasis dari pasien dengan tumor Wilms (nephroblastoma). Seperti rekan tumor primernya, Wilms10T, garis sel Wilms10M ditandai dengan penghapusan gen WT1 yang homozigot, yang mengakibatkan tidak adanya protein WT1 sama sekali. WT1 sangat penting untuk perkembangan ginjal normal, dan penghapusannya dikaitkan dengan perilaku tumor yang lebih agresif, terutama dalam pengaturan metastasis. Selain itu, sel Wilms10M menunjukkan hilangnya heterozigositas (LOH) di daerah kromosom 11p15, yang mencakup gen IGF2, yang selanjutnya berkontribusi pada sifat ganas sel-sel ini.

Sel Wilms10M mempertahankan kariotipe yang stabil tanpa penataan ulang kromosom yang besar selain dari penghapusan spesifik wilayah WT1. Garis sel ini, yang berasal dari jaringan metastasis, sangat berharga untuk mempelajari mekanisme molekuler yang mendorong metastasis pada tumor Wilms. Sel-sel menunjukkan karakteristik mesenkim, mengekspresikan penanda seperti vimentin, sementara tidak memiliki penanda epitel seperti sitokeratin, yang mengindikasikan asalnya dari komponen stroma tumor.

Penelitian tentang Wilms10M telah difokuskan pada jalur pensinyalan yang aktif dalam sel-sel metastasis ini. Analisis proteomik telah menunjukkan aktivasi beberapa reseptor tirosin kinase (RTK), termasuk IGF1R, PDGFRβ, dan AXL, yang terlibat dalam meningkatkan kelangsungan hidup sel, proliferasi, dan potensi metastasis. Jalur pensinyalan MAPK dan PI3K/AKT hilir juga diaktifkan, memainkan peran kunci dalam mempertahankan fenotipe invasif dan metastasis sel Wilms10M. Mengingat asal usul metastasisnya, Wilms10M adalah model penting untuk memahami peristiwa molekuler yang mendasari metastasis tumor Wilms dan untuk mengembangkan strategi terapeutik yang ditargetkan untuk melawan penyakit metastasis.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami