Wilms10M

Η κυτταρική σειρά Wilms10M δημιουργήθηκε από μεταστατικό πνευμονικό όζο ασθενούς με όγκο Wilms (νεφροβλάστωμα). Όπως και ο αντίστοιχος πρωτοπαθής όγκος, Wilms10T, η κυτταρική σειρά Wilms10M χαρακτηρίζεται από ομόζυγη διαγραφή του γονιδίου WT1, με αποτέλεσμα την πλήρη απουσία της πρωτεΐνης WT1. Το WT1 είναι απαραίτητο για τη φυσιολογική ανάπτυξη των νεφρών και η διαγραφή του σχετίζεται με πιο επιθετική συμπεριφορά του όγκου, ιδίως σε μεταστατικές καταστάσεις. Επιπλέον, τα κύτταρα Wilms10M παρουσιάζουν απώλεια ετεροζυγωτίας (LOH) στη χρωμοσωμική περιοχή 11p15, η οποία περιλαμβάνει το γονίδιο IGF2, συμβάλλοντας περαιτέρω στις κακοήθεις ιδιότητες αυτών των κυττάρων.

Τα κύτταρα Wilms10M διατηρούν σταθερό καρυότυπο χωρίς σημαντικές χρωμοσωμικές αναδιατάξεις, εκτός από τη συγκεκριμένη διαγραφή της περιοχής WT1. Αυτή η κυτταρική σειρά, που προέρχεται από μεταστατικό ιστό, είναι ιδιαίτερα πολύτιμη για τη μελέτη των μοριακών μηχανισμών που οδηγούν στη μετάσταση στον όγκο Wilms. Τα κύτταρα εμφανίζουν μεσεγχυματικά χαρακτηριστικά, εκφράζοντας δείκτες όπως η βιμεντίνη, ενώ στερούνται επιθηλιακών δεικτών όπως η κυτταροκερατίνη, γεγονός που είναι ενδεικτικό της προέλευσής τους από το στρωματικό συστατικό του όγκου.

Η έρευνα σχετικά με το Wilms10M έχει επικεντρωθεί στα σηματοδοτικά μονοπάτια που είναι ενεργά σε αυτά τα μεταστατικά κύτταρα. Πρωτεομικές αναλύσεις έχουν καταδείξει την ενεργοποίηση διαφόρων κινάσων τυροσίνης υποδοχέα (RTKs), συμπεριλαμβανομένων των IGF1R, PDGFRβ και AXL, οι οποίες εμπλέκονται στην προώθηση της επιβίωσης των κυττάρων, του πολλαπλασιασμού και του μεταστατικού δυναμικού. Ενεργοποιούνται επίσης τα μεταγενέστερα μονοπάτια σηματοδότησης MAPK και PI3K/AKT, τα οποία διαδραματίζουν βασικό ρόλο στη διατήρηση του διεισδυτικού και μεταστατικού φαινοτύπου των κυττάρων Wilms10M. Δεδομένης της μεταστατικής του προέλευσης, το Wilms10M είναι ένα ουσιαστικό μοντέλο για την κατανόηση των μοριακών γεγονότων που διέπουν τη μετάσταση του όγκου Wilms και για την ανάπτυξη στοχευμένων θεραπευτικών στρατηγικών κατά της μεταστατικής νόσου.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης