Wilms10M

Wilms10M hücre hattı, Wilms tümörü (nefroblastom) olan bir hastanın metastatik akciğer nodülünden oluşturulmuştur. Birincil tümör muadili Wilms10T gibi, Wilms10M hücre hattı da WT1 geninin homozigot delesyonu ile karakterize edilir ve WT1 proteininin tamamen yokluğuna neden olur. WT1 normal böbrek gelişimi için gereklidir ve delesyonu özellikle metastatik ortamlarda daha agresif tümör davranışıyla ilişkilidir. Ayrıca, Wilms10M hücreleri, IGF2 genini içeren 11p15 kromozomal bölgesinde heterozigotluk kaybı (LOH) sergileyerek bu hücrelerin malign özelliklerine daha fazla katkıda bulunur.

Wilms10M hücreleri, WT1 bölgesinin spesifik delesyonu dışında önemli bir kromozomal yeniden düzenleme olmaksızın stabil bir karyotipi korur. Metastatik dokudan türetilen bu hücre hattı, Wilms tümöründe metastazı yönlendiren moleküler mekanizmaları incelemek için özellikle değerlidir. Hücreler, vimentin gibi belirteçleri ifade ederek mezenkimal özellikler sergilerken, sitokeratin gibi epitelyal belirteçlerden yoksundur; bu da tümörün stromal bileşeninden kaynaklandıklarını gösterir.

Wilms10M üzerine yapılan araştırmalar, bu metastatik hücrelerde aktif olan sinyal yolaklarına odaklanmıştır. Proteomik analizler, IGF1R, PDGFRβ ve AXL dahil olmak üzere, hücrenin hayatta kalması, çoğalması ve metastatik potansiyelinin desteklenmesinde rol oynayan çeşitli reseptör tirozin kinazların (RTK'lar) aktivasyonunu göstermiştir. Aşağı akış MAPK ve PI3K/AKT sinyal yolakları da aktive olarak Wilms10M hücrelerinin invaziv ve metastatik fenotipinin sürdürülmesinde kilit rol oynar. Metastatik kökeni göz önüne alındığında, Wilms10M, Wilms tümör metastazının altında yatan moleküler olayları anlamak ve metastatik hastalığa karşı hedefe yönelik terapötik stratejiler geliştirmek için önemli bir modeldir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın