Wilms6

Wilms6 hücre hattı, germline WT1 mutasyonu olan bir pediatrik hastanın primer Wilms tümöründen oluşturulmuştur. Bu hücre hattı, WT1 geninde (c.1168 C>T, p.R390X) kesilmiş ve işlevsel olmayan bir WT1 proteini ile sonuçlanan homozigot bir anlamsız mutasyon ile tanımlanır. WT1, böbrek gelişiminin kritik bir düzenleyicisidir ve kaybı, özellikle mezenkimal farklılaşma gösteren vakalarda Wilms tümörü ile güçlü bir şekilde ilişkilidir. Wilms6 hücre hattı, özellikle hem epitelyal hem de mezenkimal özellikler gösteren tümörler bağlamında, tam WT1 kaybının tümörijenik etkilerini incelemek için önemli bir modeldir.

Wilms6 hücreleri ayrıca CTNNB1 geninde, özellikle β-Katenin degradasyonunu düzenleyen fosforilasyon için kilit bir bölge olan serin 45'i (p.S45F) etkileyen bir mutasyon taşır. Bu mutasyon, β-Catenin'in stabilizasyonuna ve nükleer birikimine yol açarak Wnt sinyal yolunun konstitütif aktivasyonuna neden olur. Wnt sinyalinin anormal aktivasyonu, Wilms tümörlerinde hücre proliferasyonu ve tümörigenezin bilinen bir itici gücüdür ve Wilms6'yı WT1 mutasyonlu tümörlerde Wnt yolu düzensizliğinin rolünü araştırmak için değerli bir araç haline getirir.

Fenotipik olarak Wilms6 hücreleri, orijinal tümörün stromal yapısını yansıtan güçlü vimentin ekspresyonu ve sitokeratin gibi epitelyal belirteçlerin yokluğu ile mezenkimal bir morfoloji sergiler. Bu hücrelerin, bazı Wilms tümörlerinde gözlenen mezenkimal farklılaşmayı yansıtan belirli koşullar altında kas benzeri hücrelere farklılaşma yeteneği de dahil olmak üzere sınırlı ancak dikkate değer bir farklılaşma potansiyeline sahip olduğu gösterilmiştir. Wilms6 ile ilgili proteomik çalışmalar, PDGFRβ ve AXL dahil olmak üzere, hücre sağkalımını, çoğalmasını ve göçünü desteklemede rol oynayan çoklu reseptör tirozin kinazların (RTK'lar) aktivasyonunu tanımlamıştır. MAPK ve PI3K/AKT gibi sinyal yollarının aşağı yönlü aktivasyonu, bu hücre hattının agresif doğasının altını daha da çizmektedir.

Genel olarak, Wilms6 hücre hattı, özellikle Wnt sinyal aktivasyonu ile birlikte tam WT1 kaybı durumlarında, Wilms tümör gelişiminin altında yatan moleküler mekanizmaları araştırmak için çok önemli bir model olarak hizmet etmektedir. Genetik ve fenotipik özellikleri, WT1 eksikliği ve anormal sinyal yolakları arasındaki etkileşimi incelemek için mükemmel bir platform oluşturmakta ve bu agresif tümör tipi için potansiyel terapötik hedefler hakkında içgörü sağlamaktadır.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın