Wilms6

Wilms6 ląstelių linija buvo sukurta iš pirminio Wilms'o naviko, kuris buvo diagnozuotas vaikui, sergančiam WT1 mutacija. Šiai ląstelių linijai būdinga homozigotinė nonsenso mutacija WT1 gene (c.1168 C>T, p.R390X), dėl kurios WT1 baltymas yra sutrumpėjęs ir nefunkcionalus. WT1 yra labai svarbus inkstų vystymosi reguliatorius, o jo praradimas yra glaudžiai susijęs su Vilmso navikais, ypač tais atvejais, kai pasireiškia mezenchiminė diferenciacija. Wilms6 ląstelių linija yra svarbus modelis tiriant WT1 visiško praradimo navikinį poveikį, ypač navikų, kuriems būdingi ir epiteliniai, ir mezenchiminiai požymiai, kontekste.

Wilms6 ląstelės taip pat turi CTNNB1 geno mutaciją, ypač pažeidžiančią 45 seriną (p.S45F) - pagrindinę fosforilinimo vietą, reguliuojančią βkatenino skilimą. Ši mutacija lemia β-katenino stabilizavimą ir kaupimąsi branduolyje, todėl konstituciškai aktyvuojamas Wnt signalinis kelias. Neproporcingas Wnt signalų aktyvavimas yra žinomas ląstelių proliferacijos ir navikinės genezės veiksnys Vilmso navikuose, todėl Wilms6 yra vertingas įrankis tiriant Wnt kelio disreguliacijos vaidmenį navikuose su WT1 mutacijomis.

Fenotipiškai Wilms6 ląstelės pasižymi mezenchimine morfologija, jose stipriai išreikštas vimentinas ir nėra epitelinių žymenų, tokių kaip citokeratinas, o tai atspindi pirminio naviko stromalinį pobūdį. Nustatyta, kad šios ląstelės turi ribotą, bet pastebimą diferenciacijos potencialą, įskaitant gebėjimą tam tikromis sąlygomis diferencijuotis į raumenines ląsteles, o tai atspindi kai kurių Vilmso navikų mezenchiminę diferenciaciją. Atlikus Vilmso vėžio6 proteominius tyrimus nustatyta, kad aktyvuotos kelios receptorių tirozino kinazės (RTK), įskaitant PDGFRβ ir AXL, kurios skatina ląstelių išgyvenamumą, proliferaciją ir migraciją. Tolesnis tokių signalinių kelių, kaip MAPK ir PI3K/AKT, aktyvinimas dar labiau pabrėžia agresyvų šios ląstelių linijos pobūdį.

Apskritai, Wilms6 ląstelių linija yra labai svarbus modelis tiriant molekulinius mechanizmus, lemiančius Wilms naviko vystymąsi, ypač tais atvejais, kai visiškai prarandamas WT1 ir aktyvuojamas Wnt signalas. Dėl jos genetinių ir fenotipinių savybių ji tampa puikia platforma WT1 trūkumo ir pakitusių signalinių kelių sąveikai tirti, leidžiančia įžvelgti galimus šio agresyvaus tipo naviko gydymo taikinius.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime