Wilms6

Клітинна лінія Wilms6 була отримана з первинної пухлини Вільмса у педіатричного пацієнта з мутацією зародкової лінії WT1. Ця клітинна лінія визначається гомозиготною нонсенс-мутацією в гені WT1 (c.1168 C>T, p.R390X), в результаті якої утворюється усічений і нефункціональний білок WT1. WT1 є важливим регулятором розвитку нирок, і його втрата тісно пов'язана з пухлиною Вільмса, особливо у випадках з мезенхімальним диференціюванням. Клітинна лінія Wilms6 є важливою моделлю для вивчення пухлинних ефектів повної втрати WT1, особливо в контексті пухлин, які мають як епітеліальні, так і мезенхімальні характеристики.

Клітини Wilms6 також несуть мутацію в гені CTNNB1, яка специфічно впливає на серин 45 (p.S45F), ключовий сайт фосфорилювання, що регулює деградацію β-катеніну. Ця мутація призводить до стабілізації та ядерного накопичення β-катеніну, що спричиняє конститутивну активацію сигнального шляху Wnt. Аберантна активація сигнального шляху Wnt є відомим драйвером клітинної проліферації та пухлиноутворення в пухлинах Вільмса, що робить Wilms6 цінним інструментом для дослідження ролі дисрегуляції сигнального шляху Wnt в пухлинах з мутаціями WT1.

Фенотипічно клітини Wilms6 мають мезенхімальну морфологію з високою експресією віментину і відсутністю епітеліальних маркерів, таких як цитокератин, що відображає стромальну природу вихідної пухлини. Показано, що ці клітини мають обмежений, але помітний потенціал диференціювання, включаючи здатність диференціюватися в м'язові клітини за певних умов, що відображає мезенхімальну диференціацію, яка спостерігається в деяких пухлинах Вільмса. Протеомні дослідження пухлини Вільмса6 виявили активацію декількох рецепторних тирозинкіназ (RTK), включаючи PDGFRβ і AXL, які беруть участь у сприянні виживанню, проліферації та міграції клітин. Подальша активація сигнальних шляхів, таких як MAPK і PI3K/AKT, ще більше підкреслює агресивну природу цієї клітинної лінії.

В цілому, клітинна лінія Wilms6 слугує важливою моделлю для вивчення молекулярних механізмів, що лежать в основі розвитку пухлини Вільмса, особливо у випадках повної втрати WT1 у поєднанні з активацією сигнального шляху Wnt. Її генетичні та фенотипічні характеристики роблять її чудовою платформою для вивчення взаємодії між дефіцитом WT1 та аберантними сигнальними шляхами, забезпечуючи розуміння потенційних терапевтичних мішеней для цього агресивного типу пухлин.

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>