Wilms6

Bunková línia Wilms6 bola vytvorená z primárneho Wilmsovho nádoru u detského pacienta so zárodočnou mutáciou WT1. Táto bunková línia je definovaná homozygotnou nezmyselnou mutáciou v géne WT1 (c.1168 C>T, p.R390X), ktorej výsledkom je skrátený a nefunkčný proteín WT1. WT1 je kritickým regulátorom vývoja obličiek a jeho strata je silne spojená s Wilmsovým nádorom, najmä v prípadoch vykazujúcich mezenchymálnu diferenciáciu. Bunková línia Wilms6 je dôležitým modelom na štúdium tumorigénnych účinkov úplnej straty WT1, najmä v kontexte nádorov, ktoré vykazujú epitelové aj mezenchymálne charakteristiky.

Bunky Wilms6 tiež nesú mutáciu v géne CTNNB1, ktorá konkrétne postihuje serín 45 (p.S45F), kľúčové miesto pre fosforyláciu, ktorá reguluje degradáciu β-katenínu. Táto mutácia vedie k stabilizácii a jadrovej akumulácii β-Cateninu, čo má za následok konštitutívnu aktiváciu signálnej dráhy Wnt. Aberantná aktivácia signalizácie Wnt je známym hnacím motorom bunkovej proliferácie a tumorigenézy v nádoroch Wilms, vďaka čomu je Wilms6 cenným nástrojom na skúmanie úlohy dysregulácie dráhy Wnt v nádoroch s mutáciami WT1.

Fenotypovo bunky Wilms6 vykazujú mezenchýmovú morfológiu so silnou expresiou vimentínu a absenciou epitelových markerov, ako je cytokeratín, čo odráža stromálnu povahu pôvodného nádoru. Ukázalo sa, že tieto bunky majú obmedzený, ale pozoruhodný diferenciačný potenciál vrátane schopnosti diferencovať sa za špecifických podmienok na bunky podobné svalom, čo odráža mezenchýmovú diferenciáciu pozorovanú v niektorých Wilmsových nádoroch. Proteomické štúdie Wilmsovho nádoru6 identifikovali aktiváciu viacerých receptorových tyrozínkináz (RTK) vrátane PDGFRβ a AXL, ktoré sa podieľajú na podpore prežívania, proliferácie a migrácie buniek. Následná aktivácia signálnych dráh, ako sú MAPK a PI3K/AKT, ďalej zdôrazňuje agresívnu povahu tejto bunkovej línie.

Celkovo slúži bunková línia Wilms6 ako kľúčový model na skúmanie molekulárnych mechanizmov, ktoré sú základom vývoja Wilmsovho nádoru, najmä v prípadoch úplnej straty WT1 v kombinácii s aktiváciou signalizácie Wnt. Vďaka svojim genetickým a fenotypovým vlastnostiam je vynikajúcou platformou na štúdium vzájomného pôsobenia medzi nedostatkom WT1 a aberantnými signálnymi dráhami, čo poskytuje pohľad na potenciálne terapeutické ciele pre tento agresívny typ nádoru.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke