Wilms6

A Wilms6 sejtvonalat egy csíravonalbeli WT1 mutációval rendelkező gyermekbeteg primer Wilms-tumorából hozták létre. Ezt a sejtvonalat a WT1 gén homozigóta nonszensz mutációja (c.1168 C>T, p.R390X) határozza meg, amely csonka és nem funkcionális WT1 fehérjét eredményez. A WT1 a vese fejlődésének kritikus szabályozója, és elvesztése erősen összefügg a Wilms-tumorral, különösen a mesenchymális differenciálódást mutató esetekben. A Wilms6 sejtvonal fontos modell a WT1 teljes elvesztésének tumorigén hatásainak tanulmányozására, különösen az epiteliális és mesenchymális jellemzőket egyaránt mutató tumorok összefüggésében.

A Wilms6 sejtek a CTNNB1 génben is mutációt hordoznak, amely kifejezetten a 45-ös szerint (p.S45F) érinti, amely a β-katenin degradációját szabályozó foszforiláció kulcsfontosságú helye. Ez a mutáció a β-Catenin stabilizálódásához és nukleáris felhalmozódásához vezet, ami a Wnt jelátviteli útvonal konstitutív aktiválódását eredményezi. A Wnt jelátvitel aberráns aktivációja a Wilms-tumorokban a sejtproliferáció és a tumorigenezis ismert mozgatórugója, így a Wilms6 értékes eszköz a WT1 mutációval rendelkező tumorokban a Wnt-útvonal diszregulációjának szerepének vizsgálatára.

Fenotípusosan a Wilms6 sejtek mesenchymális morfológiát mutatnak, a vimentin erős expressziójával és az epiteliális markerek, például a citokeratin hiányával, ami az eredeti tumor stromális jellegét tükrözi. Kimutatták, hogy ezek a sejtek korlátozott, de figyelemre méltó differenciálódási potenciállal rendelkeznek, beleértve azt a képességet, hogy bizonyos körülmények között izomszerű sejtekké differenciálódnak, ami tükrözi a néhány Wilms-tumorban megfigyelt mesenchymális differenciálódást. A Wilms6 proteomikai vizsgálatai több receptor-tirozin-kináz (RTK), köztük a PDGFRβ és az AXL aktiválódását azonosították, amelyek részt vesznek a sejtek túlélésének, proliferációjának és migrációjának elősegítésében. Az olyan jelátviteli útvonalak, mint a MAPK és a PI3K/AKT downstream aktivációja tovább hangsúlyozza e sejtvonal agresszív jellegét.

Összességében a Wilms6 sejtvonal kulcsfontosságú modellként szolgál a Wilms-tumor kialakulásának hátterében álló molekuláris mechanizmusok feltárásához, különösen a WT1 teljes elvesztése és a Wnt-szignálok aktiválódása esetén. Genetikai és fenotípusos jellemzői kiváló platformmá teszik a WT1-hiány és az aberráns jelátviteli útvonalak közötti kölcsönhatás tanulmányozására, betekintést nyújtva ezen agresszív tumortípus lehetséges terápiás célpontjaiba.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban