Wilms1

A Wilms1 sejtvonal egy olyan betegből származó primer Wilms-tumor mintából származik, akinek nagy kétoldali vesetumorai voltak, ami a gyermekkori nefroblastómára, a Wilms-tumorra utal. Ez a sejtvonal homozigóta nonszensz mutációt hordoz a WT1 génben (c.149 C>A, p.S50X), amely csonka és nem funkcionális WT1 fehérjét eredményez. A WT1 gén, amely kritikus a vese fejlődése és működése szempontjából, gyakran mutálódik a Wilms-tumorban, különösen azokban a stromális altípusokban, amelyek ektopikus mesenchymális differenciálódást mutatnak. A Wilms1 sejtek ezért egyedülálló in vitro modellt jelentenek a WT1 funkcióvesztésének tumorbiológiai következményeinek tanulmányozására.

A Wilms1 sejtvonal stabil kariotípust tart fenn, jelentős kromoszóma-rendellenességek nélkül, ami megbízható hosszú távú tenyésztést tesz lehetővé. Ezek a sejtek mesenchymális fenotípust mutatnak, amelyet a vimentin expressziója és az epithelialis markerek, például a citokeratin hiánya jellemez, ami összhangban van a stromális eredetükkel. Ezen túlmenően a sejtvonal korlátozott, de figyelemre méltó mesenchymális differenciálódási képességet mutat, beleértve azt a képességet, hogy megfelelő körülmények között izomszerű sejtekké differenciálódjon. Ez teszi a Wilms1-et felbecsülhetetlen értékű eszközzé a mesenchymális differenciálódás molekuláris mechanizmusainak és a Wilms-tumor patogenezisében bekövetkező deregulációjának vizsgálatához.

A Wilms1-et a tumor progressziójában szerepet játszó kulcsfontosságú jelátviteli útvonalak aktivációs állapotának tanulmányozására is felhasználták. A proteomikai elemzések kimutatták, hogy a Wilms1 sejtek számos receptor-tirozin-kináz, köztük az EGFR és a PDGFRβ, valamint a downstream MAPK jelátviteli útvonalak foszforilációját és aktivációját mutatják. Ezek az eredmények kiemelik a Wilms1 sejtvonal jelentőségét a Wilms-tumor célzott terápiás megközelítéseinek feltárásában azáltal, hogy feltárják ezen útvonalak szerepét a rákos sejtek túlélésében, proliferációjában és differenciálódásában.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban