Wilms1

La lignée cellulaire Wilms1 a été dérivée d'un échantillon primaire de tumeur de Wilms prélevé sur un patient présentant de grandes tumeurs rénales bilatérales, indiquant une tumeur de Wilms, un néphroblastome pédiatrique. Cette lignée cellulaire est porteuse d'une mutation homozygote non-sens dans le gène WT1 (c.149 C>A, p.S50X), qui se traduit par une protéine WT1 tronquée et non fonctionnelle. Le gène WT1, essentiel au développement et à la fonction du rein, est fréquemment muté dans les tumeurs de Wilms, en particulier dans celles dont le sous-type stromal présente une différenciation mésenchymateuse ectopique. Les cellules Wilms1 représentent donc un modèle in vitro unique pour étudier les conséquences de la perte de fonction de WT1 dans la biologie des tumeurs.

La lignée cellulaire Wilms1 présente un caryotype stable sans anomalie chromosomique significative, ce qui permet une culture fiable à long terme. Ces cellules présentent un phénotype mésenchymateux, caractérisé par l'expression de la vimentine et l'absence de marqueurs épithéliaux tels que la cytokératine, ce qui est cohérent avec leur origine stromale. En outre, la lignée cellulaire présente une capacité de différenciation mésenchymateuse limitée mais notable, y compris la capacité de se différencier en cellules de type musculaire dans des conditions appropriées. Cela fait de Wilms1 un outil précieux pour l'étude des mécanismes moléculaires de la différenciation mésenchymateuse et de sa dérégulation dans la pathogenèse des tumeurs de Wilms.

Wilms1 a également été utilisé pour étudier l'état d'activation des principales voies de signalisation impliquées dans la progression tumorale. Les analyses protéomiques ont montré que les cellules Wilms1 présentent une phosphorylation et une activation de plusieurs récepteurs tyrosine kinases, notamment l'EGFR et le PDGFRβ, ainsi que des voies de signalisation MAPK en aval. Ces résultats soulignent l'importance de la lignée cellulaire Wilms1 dans l'exploration d'approches thérapeutiques ciblées pour la tumeur de Wilms en disséquant le rôle de ces voies dans la survie, la prolifération et la différenciation des cellules cancéreuses.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie