Wilms1

Wilms1 šūnu līnija tika iegūta no primārā Wilms audzēja parauga, kas iegūts no pacienta ar lieliem abpusējiem nieru audzējiem, kas liecina par Wilms audzēju, bērnu nefroblastomu. Šai šūnu līnijai ir homozigotiska bezjēdzīga WT1 gēna mutācija (c.149 C>A, p.S50X), kas izraisa saīsinātu un nefunkcionālu WT1 proteīnu. WT1 gēns, kas ir ļoti svarīgs nieru attīstībai un funkcijām, bieži mutē Vilmsa audzējos, jo īpaši stromas apakštipa audzējos, kam raksturīga ektopiska mezenhīma diferenciācija. Tāpēc Wilms1 šūnas ir unikāls in vitro modelis, lai pētītu WT1 funkcijas zuduma sekas audzēja bioloģijā.

Wilms1 šūnu līnija saglabā stabilu kariotipu bez būtiskām hromosomālām anomālijām, kas ļauj droši audzēt ilgstoši. Šīm šūnām piemīt mezenhīma fenotips, ko raksturo vimentīna ekspresija un tādu epitēlija marķieru kā citokeratīna trūkums, kas atbilst to stromālai izcelsmei. Turklāt šūnu līnija uzrāda ierobežotu, bet ievērojamu mezenhimālo diferenciācijas spēju, tostarp spēju piemērotos apstākļos diferencēties muskuļiem līdzīgās šūnās. Tas padara Wilms1 par nenovērtējamu līdzekli mezenhimālās diferenciācijas molekulāro mehānismu un to deregulācijas Vilmsa audzēja patoģenēzes procesā izpētei.

Wilms1 ir izmantots arī, lai pētītu audzēja progresijā iesaistīto galveno signalizācijas ceļu aktivācijas statusu. Proteomiskās analīzes liecina, ka Wilms1 šūnās fosforilē un aktivizējas vairākas receptoru tirozīna kināzes, tostarp EGFR un PDGFRβ, kā arī pakārtotie MAPK signalizācijas ceļi. Šie atklājumi uzsver Wilms1 šūnu līnijas nozīmīgumu, pētot mērķtiecīgas terapeitiskās pieejas Wilms audzēja ārstēšanai, analizējot šo ceļu lomu vēža šūnu izdzīvošanā, proliferācijā un diferenciācijā.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu