Wilms1
Cell line · 제품 번호 300411
Wilms1 세포주는 양측 신장에 큰 종양이 발견되어 Wilms 종양으로 의심되는 환자에게서 채취한 원발성 Wilms 종양 조직에서 유래되었으며, 이는 Wi...
사용자 지정 / 추천 사항
- Wilms1Cell line€800.00
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01일반 정보
- 설명
Wilms1 세포주는 소아 신세포종인 윌름스 종양을 나타내는 큰 양측 신장 종양을 가진 환자로부터 얻은 원발성 윌름스 종양 샘플에서 추출했습니다. 이 세포주는 WT1 유전자에 동형접합 넌센스 돌연변이(c.149 C>A, p.S50X)를 보유하고 있으며, 이로 인해 WT1 단백질이 절단되고 기능이 없는 상태입니다. 신장 발달과 기능에 중요한 WT1 유전자는 윌름스 종양, 특히 이소성 중간엽 분화를 보이는 기질 아형을 가진 환자에서 자주 돌연변이가 발생합니다. 따라서 Wilms1 세포는 종양 생물학에서 WT1 기능 상실의 결과를 연구하기 위한 독특한 시험관 내 모델을 나타냅니다.
Wilms1 세포주는 심각한 염색체 이상 없이 안정적인 핵형을 유지하므로 장기간 안정적으로 배양할 수 있습니다. 이 세포는 기질 기원과 일치하는 비멘틴의 발현과 사이토케라틴과 같은 상피 마커의 부재를 특징으로 하는 중간엽 표현형을 나타냅니다. 또한 이 세포주는 적절한 조건에서 근육과 유사한 세포로 분화할 수 있는 능력을 포함하여 제한적이지만 주목할 만한 중간엽 분화 능력을 보여줍니다. 따라서 Wilms1은 중간엽 분화의 분자적 메커니즘과 윌름스 종양 병인에서 중간엽 분화의 조절 기능 저하를 조사하는 데 매우 중요한 도구가 될 수 있습니다.
Wilms1은 종양 진행에 관여하는 주요 신호 경로의 활성화 상태를 연구하는 데도 사용되었습니다. 단백질체 분석에 따르면 Wilms1 세포는 EGFR 및 PDGFRβ를 포함한 여러 수용체 티로신 키나제와 다운스트림 MAPK 신호 전달 경로의 인산화 및 활성화를 보이는 것으로 나타났습니다. 이러한 발견은 암세포 생존, 증식 및 분화에서 이러한 경로의 역할을 해부함으로써 Wilms 종양에 대한 표적 치료 접근법을 탐색하는 데 있어 Wilms1 세포주의 관련성을 강조합니다.
- 티슈
- 신장
- 응용 분야
- 체외 세포 배양 모델. 생화학 연구
- 동의어
- Wilms1-2l
02분류
- 생물체
- 인간
- 성
- 여성
- 성장 특성
- 준수자
- 생물안전 등급
- 1
03특징
- 형태학
- 스핀들 모양
- 세포 유형
- 윌름스 세포
- 종양 유발성
- 예, 누드 마우스에서. 윌름 종양과 일치하는 작은 세포로 종양 형성(이종 이식이 윌름 종양을 완전히 나타내지 않을 수 있음, E. Kunce Stroup 2017 참조)
- 염색체형
- 46, 정상
- 배가 시간
- 24시간
04식별자
- 인용
- Wilms1(사이티온 카탈로그 번호 300411)
- NCBI 세금 식별번호
- 9606
- 셀로사우루스
- CVCL_A5SC
05발현 및 감수성
- 발현된 수용체
- 수용체 티로신 키나아제 EGFR, EphA7, PDGFRalpha, FGFR1, PDGFRbeta, AxL
- 돌연변이 프로파일
- WT1 돌연변이 상태: 동형접합 c. 149 C>A, p.S50x, LOH: 11p11-11pter, CTNNB1 돌연변이 상태: 이형접합 TCT>TTT, p.S45F
- 바이러스
- HIV-1: 음성, HBV: 음성, HCV: 음성
06취급 및 배양
- 배지
- MSCGM 키트(Lonza 제공)
- 배양 조건
37°C, 5%CO2, 습한 대기.
- 분리 시약
- 아큐타제
- 재배양
- 부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
- 파종 밀도
- 1 x 10⁴ 세포/cm²
- 유체 교체
- 주 1~2회
- 해동 후 회복
- 빠른
- 해동 및 배양
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07품질 관리 및 냉동 보존
- 불임
마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.
박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.
- 배양액 동결
- 냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
- 보관 조건
장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.
- 배송 조건
냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.
08기부자
- 기증자 연령
- 2년
- 민족
- 백인
09법률 및 안전
- 안전 수칙
- 향후 해동을 위해 액체 질소에 냉동 보관을 계획하는 경우, 엄격한 안전 조치를 준수해야 합니다. 적절한 보호 장갑과 의복은 필수이며, 액체 질소 탱크로 냉동 샘플을 옮길 때는 반드시 안면 마스크나 보안경을 착용해야 합니다. 이는 제거 시 날카로운 파편이 튀어나올 수 있는 극저온 폭발로 인한 부상 위험을 줄이기 위한 것입니다.
- 보증
싸이티온은 제품의 품질과 생존력을 보증합니다. 당사는 당사 시설에서 배송된 후 60일 동안 배양 시작 시 세포가 생존할 수 있음을 보증합니다. 당사는 모든 재료가 분석 증명서 및/또는 제품 시트에 설명된 사양을 준수함을 보증합니다
자세한 내용은 <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">보증서 를 참조하시기 바랍니다
- 물질 이전 계약서(MTA)가 필요합니다.
- 네
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