Wilms1

De Wilms1-cellijn is afgeleid van een primair Wilms-tumormonster van een patiënt met grote bilaterale niertumoren, wat wijst op Wilms tumor, een pediatrisch nefroblastoom. Deze cellijn bevat een homozygote nonsensmutatie in het WT1-gen (c.149 C>A, p.S50X), die resulteert in een afgekapt en niet-functioneel WT1-eiwit. Het WT1-gen, dat cruciaal is voor de ontwikkeling en functie van de nier, is vaak gemuteerd in Wilms tumoren, vooral in die met een stromaal subtype dat ectopische mesenchymale differentiatie vertoont. Wilms1-cellen vormen daarom een uniek in vitro model voor het bestuderen van de gevolgen van functieverlies van WT1 in de tumorbiologie.

De Wilms1-cellijn heeft een stabiel karyotype zonder significante chromosoomafwijkingen, waardoor een betrouwbare kweek op lange termijn mogelijk is. Deze cellen vertonen een mesenchymaal fenotype, gekenmerkt door de expressie van vimentine en de afwezigheid van epitheliale markers zoals cytokeratine, wat consistent is met hun stromale oorsprong. Daarnaast laat de cellijn een beperkte maar opmerkelijke mesenchymale differentiatiecapaciteit zien, waaronder het vermogen om onder de juiste omstandigheden te differentiëren in spierachtige cellen. Dit maakt Wilms1 van onschatbare waarde voor het onderzoeken van de moleculaire mechanismen van mesenchymale differentiatie en de ontregeling ervan in de pathogenese van Wilms-tumoren.

Wilms1 is ook gebruikt om de activeringsstatus te bestuderen van belangrijke signaalwegen die betrokken zijn bij tumorgroei. Proteomische analyses hebben aangetoond dat Wilms1-cellen fosforylering en activering van verschillende receptor tyrosinekinasen vertonen, waaronder EGFR en PDGFRβ, evenals downstream MAPK-signaalroutes. Deze bevindingen benadrukken het belang van de Wilms1 cellijn voor het onderzoeken van gerichte therapeutische benaderingen voor Wilms tumor door het ontleden van de rol van deze pathways in overleving, proliferatie en differentiatie van kankercellen.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring