Wilms1

La línea celular Wilms1 se derivó de una muestra primaria de tumor de Wilms obtenida de un paciente que presentaba grandes tumores renales bilaterales, indicativos de tumor de Wilms, un nefroblastoma pediátrico. Esta línea celular presenta una mutación homocigota sin sentido en el gen WT1 (c.149 C>A, p.S50X), que da lugar a una proteína WT1 truncada y no funcional. El gen WT1, crítico para el desarrollo y la función renal, está frecuentemente mutado en el tumor de Wilms, particularmente en aquellos con un subtipo estromal que exhibe una diferenciación mesenquimal ectópica. Las células Wilms1, por tanto, representan un modelo in vitro único para estudiar las consecuencias de la pérdida de función de WT1 en la biología tumoral.

La línea celular Wilms1 mantiene un cariotipo estable sin anomalías cromosómicas significativas, lo que permite un cultivo fiable a largo plazo. Estas células presentan un fenotipo mesenquimal, caracterizado por la expresión de vimentina y la ausencia de marcadores epiteliales como la citoqueratina, lo que concuerda con su origen estromal. Además, la línea celular demuestra una capacidad de diferenciación mesenquimal limitada pero notable, incluida la capacidad de diferenciarse en células de tipo muscular en condiciones adecuadas. Esto convierte a Wilms1 en una herramienta inestimable para investigar los mecanismos moleculares de la diferenciación mesenquimal y su desregulación en la patogénesis del tumor de Wilms.

Wilms1 también se ha utilizado para estudiar el estado de activación de vías de señalización clave implicadas en la progresión tumoral. Los análisis proteómicos han demostrado que las células Wilms1 presentan fosforilación y activación de varios receptores tirosina quinasa, incluidos EGFR y PDGFRβ, así como de las vías de señalización MAPK descendentes. Estos hallazgos ponen de relieve la importancia de la línea celular Wilms1 en la exploración de enfoques terapéuticos dirigidos para el tumor de Wilms mediante la disección del papel de estas vías en la supervivencia, proliferación y diferenciación de las células cancerosas.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía