Wilms1

Wilms1-solulinja on peräisin primaarisesta Wilmsin kasvainnäytteestä, joka saatiin potilaalta, jolla oli suuria molemminpuolisia munuaiskasvaimia, jotka viittaavat Wilmsin kasvaimeen, joka on pediatrinen nefroblastooma. Tässä solulinjassa on homotsygoottinen nonsense-mutaatio WT1-geenissä (c.149 C>A, p.S50X), joka johtaa typistettyyn ja toimimattomaan WT1-proteiiniin. WT1-geeni, joka on kriittinen munuaisten kehityksen ja toiminnan kannalta, on usein mutaantunut Wilmsin kasvaimissa, erityisesti niissä, joiden stroomaalinen alatyyppi on ektooppinen mesenkymaalinen erilaistuminen. Wilms1-solut edustavat näin ollen ainutlaatuista in vitro -mallia, jolla voidaan tutkia WT1:n toimintakyvyn menetyksen seurauksia kasvainten biologiassa.

Wilms1-solulinja säilyttää vakaan karyotyypin ilman merkittäviä kromosomipoikkeavuuksia, mikä mahdollistaa luotettavan pitkäaikaisen viljelyn. Näillä soluilla on mesenkymaalinen fenotyyppi, jolle on ominaista vimentiinin ilmentyminen ja epiteelimerkkiaineiden, kuten sytokeratiinin, puuttuminen, mikä on johdonmukaista niiden stroomaperäisyyden kanssa. Lisäksi solulinjalla on rajallinen mutta huomattava mesenkymaalinen erilaistumiskyky, mukaan lukien kyky erilaistua lihaksen kaltaisiksi soluiksi sopivissa olosuhteissa. Tämä tekee Wilms1:stä korvaamattoman arvokkaan välineen mesenkymaalisen erilaistumisen molekyylimekanismien ja sen deregulaation tutkimiseen Wilmsin kasvainten patogeneesissä.

Wilms1:n avulla on myös tutkittu kasvaimen etenemiseen osallistuvien keskeisten signaalireittien aktivoitumistilaa. Proteomianalyysit ovat osoittaneet, että Wilms1-soluissa esiintyy useiden reseptorityrosiinikinaasien, kuten EGFR:n ja PDGFRβ:n, fosforylaatioita ja aktivoitumista, samoin kuin myöhempien MAPK-signalointireittien. Nämä havainnot korostavat Wilms1-solulinjan merkitystä tutkittaessa kohdennettuja hoitokeinoja Wilmsin kasvaimiin selvittämällä näiden reittien roolia syöpäsolujen selviytymisessä, lisääntymisessä ja erilaistumisessa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa