Wilms1

Wilms1-cellelinjen ble avledet fra en primær Wilms-svulstprøve fra en pasient med store bilaterale nyresvulster, noe som tyder på Wilms-svulst, et pediatrisk nefroblastom. Denne cellelinjen har en homozygot nonsensmutasjon i WT1-genet (c.149 C>A, p.S50X), noe som resulterer i et avkortet og ikke-funksjonelt WT1-protein. WT1-genet, som er kritisk for nyrenes utvikling og funksjon, er ofte mutert i Wilms-svulster, særlig i dem med en stromal subtype som viser ektopisk mesenkymal differensiering. Wilms1-celler representerer derfor en unik in vitro-modell for å studere konsekvensene av tap av WT1-funksjon i tumorbiologi.

Wilms1-cellelinjen har en stabil karyotype uten signifikante kromosomavvik, noe som gir mulighet for pålitelig langtidsdyrking. Disse cellene har en mesenkymal fenotype, karakterisert ved uttrykk av vimentin og fravær av epitelmarkører som cytokeratin, noe som stemmer overens med deres stromale opprinnelse. I tillegg viser cellelinjen en begrenset, men bemerkelsesverdig mesenkymal differensieringskapasitet, inkludert evnen til å differensiere til muskellignende celler under passende forhold. Dette gjør Wilms1 til et uvurderlig verktøy for å undersøke de molekylære mekanismene for mesenkymal differensiering og dereguleringen av denne i Wilms' svulstpatogenese.

Wilms1 har også blitt brukt til å studere aktiveringsstatusen til viktige signalveier som er involvert i svulstprogresjon. Proteomanalyser har vist at Wilms1-celler viser fosforylering og aktivering av flere reseptortyrosinkinaser, inkludert EGFR og PDGFRβ, samt nedstrøms MAPK-signalveier. Disse funnene understreker relevansen av Wilms1-cellelinjen i utforskningen av målrettede terapeutiske tilnærminger for Wilms-svulster ved å dissekere disse signalveienes rolle i kreftcellenes overlevelse, spredning og differensiering.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring