Wilms1

La línea celular Wilms1 se derivó de una muestra de tumor de Wilms primario obtenida de un paciente que presentaba tumores renales bilaterales de gran tamaño, lo cual es indicativo de tumor de Wilms, un nefroblastoma pediátrico. Esta línea celular presenta una mutación sin sentido homocigótica en el gen WT1 (c.149 C>A, p.S50X), lo que da lugar a una proteína WT1 truncada y no funcional. El gen WT1, fundamental para el desarrollo y la función renal, sufre mutaciones con frecuencia en el tumor de Wilms, especialmente en aquellos con un subtipo estromal que presenta diferenciación mesenquimal ectópica. Por lo tanto, las células Wilms1 representan un modelo in vitro único para estudiar las consecuencias de la pérdida de función de WT1 en la biología tumoral.

La línea celular Wilms1 mantiene un cariotipo estable sin anomalías cromosómicas significativas, lo que permite un cultivo confiable a largo plazo. Estas células presentan un fenotipo mesenquimal, caracterizado por la expresión de vimentina y la ausencia de marcadores epiteliales como la citoqueratina, lo cual concuerda con su origen estromal. Además, la línea celular demuestra una capacidad de diferenciación mesenquimal limitada pero notable, incluida la capacidad de diferenciarse en células de tipo muscular en condiciones adecuadas. Esto convierte a Wilms1 en una herramienta invaluable para investigar los mecanismos moleculares de la diferenciación mesenquimal y su desregulación en la patogénesis del tumor de Wilms.

Wilms1 también se ha utilizado para estudiar el estado de activación de las vías de señalización clave involucradas en la progresión tumoral. Los análisis proteómicos han demostrado que las células Wilms1 presentan fosforilación y activación de varios receptores de tirosina quinasa, incluidos el EGFR y el PDGFRβ, así como de las vías de señalización MAPK posteriores. Estos hallazgos resaltan la relevancia de la línea celular Wilms1 en la exploración de enfoques terapéuticos dirigidos para el tumor de Wilms, al desentrañar el papel de estas vías en la supervivencia, proliferación y diferenciación de las células cancerosas.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.