Wilms1

A linha celular Wilms1 foi derivada de uma amostra de tumor primário de Wilms obtida de um doente que apresentava grandes tumores renais bilaterais, indicativos de tumor de Wilms, um nefroblastoma pediátrico. Esta linha celular tem uma mutação homozigótica sem sentido no gene WT1 (c.149 C>A, p.S50X), que resulta numa proteína WT1 truncada e não funcional. O gene WT1, crítico para o desenvolvimento e função dos rins, é frequentemente mutado no tumor de Wilms, particularmente naqueles com um subtipo estromal que exibe diferenciação mesenquimal ectópica. As células Wilms1, portanto, representam um modelo in vitro único para estudar as consequências da perda de função do WT1 na biologia tumoral.

A linha celular Wilms1 mantém um cariótipo estável, sem anomalias cromossómicas significativas, o que permite uma cultura fiável a longo prazo. Estas células apresentam um fenótipo mesenquimal, caracterizado pela expressão de vimentina e pela ausência de marcadores epiteliais como a citoqueratina, o que é consistente com a sua origem estromal. Além disso, a linha celular demonstra uma capacidade de diferenciação mesenquimal limitada, mas notável, incluindo a capacidade de se diferenciar em células semelhantes a músculos em condições adequadas. Isto faz da Wilms1 uma ferramenta inestimável para investigar os mecanismos moleculares da diferenciação mesenquimal e a sua desregulação na patogénese do tumor de Wilms.

A Wilms1 também tem sido utilizada para estudar o estado de ativação das principais vias de sinalização envolvidas na progressão do tumor. As análises proteómicas mostraram que as células Wilms1 apresentam fosforilação e ativação de vários receptores tirosina-quinases, incluindo o EGFR e o PDGFRβ, bem como das vias de sinalização MAPK a jusante. Estes resultados realçam a relevância da linha celular Wilms1 na exploração de abordagens terapêuticas direcionadas para o tumor de Wilms, dissecando o papel destas vias na sobrevivência, proliferação e diferenciação das células cancerígenas.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia