Wilms1

Wilms1 ląstelių linija buvo gauta iš pirminio Vilmso naviko mėginio, paimto iš paciento, kuriam buvo nustatyti dideli abipusiai inkstų navikai, rodantys Vilmso naviką, vaikų nefroblastomą. Ši ląstelių linija turi homozigotinę WT1 geno beprasmę mutaciją (c.149 C>A, p.S50X), dėl kurios WT1 baltymas yra sutrumpėjęs ir nefunkcionalus. WT1 genas, kuris yra labai svarbus inkstų vystymuisi ir funkcijai, dažnai mutuoja Vilmso navikuose, ypač stromos potipio navikuose, kuriems būdinga ektopinė mezenchiminė diferenciacija. Todėl Wilms1 ląstelės yra unikalus in vitro modelis WT1 funkcijos praradimo pasekmėms naviko biologijoje tirti.

Wilms1 ląstelių linija išlaiko stabilų kariotipą be reikšmingų chromosominių anomalijų, todėl ją galima patikimai auginti ilgą laiką. Šioms ląstelėms būdingas mezenchiminis fenotipas, kuriam būdinga vimentino raiška ir epitelio žymenų, tokių kaip citokeratinas, nebuvimas, o tai atitinka jų stromos kilmę. Be to, ši ląstelių linija pasižymi ribotomis, bet pastebimomis mezenchiminės diferenciacijos savybėmis, įskaitant gebėjimą atitinkamomis sąlygomis diferencijuotis į raumenines ląsteles. Dėl to Wilms1 yra neįkainojama priemonė tiriant molekulinius mezenchiminės diferenciacijos mechanizmus ir jų dereguliaciją Vilmso naviko patogenezėje.

Wilms1 taip pat buvo naudojamas tiriant pagrindinių signalinių kelių, susijusių su naviko progresavimu, aktyvumo būklę. Proteominės analizės parodė, kad "Wilms1" ląstelėse fosforilėja ir aktyvuojasi kelios receptorių tirozino kinazės, įskaitant EGFR ir PDGFRβ, taip pat tolesni MAPK signaliniai keliai. Šios išvados rodo, kad Wilms1 ląstelių linija yra svarbi tiriant tikslinius Wilms naviko gydymo metodus, išskiriant šių kelių vaidmenį vėžinių ląstelių išgyvenimui, proliferacijai ir diferenciacijai.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime