Wilms1

Celična linija Wilms1 je bila pridobljena iz vzorca primarnega Wilmsovega tumorja, pridobljenega od bolnika z velikimi obojestranskimi ledvičnimi tumorji, ki kažejo na Wilmsov tumor, pediatrični nefroblastom. Ta celična linija ima homozigotno nesmiselno mutacijo v genu WT1 (c.149 C>A, p.S50X), ki povzroča skrajšano in nefunkcionalno beljakovino WT1. Gen WT1, ki je ključen za razvoj in delovanje ledvic, je pogosto mutiran pri Wilmsovem tumorju, zlasti pri tumorjih s stromalnim podtipom, ki ima ektopično mezenhimsko diferenciacijo. Celice Wilms1 zato predstavljajo edinstven in vitro model za preučevanje posledic izgube funkcije WT1 v biologiji tumorjev.

Celična linija Wilms1 ohranja stabilen kariotip brez pomembnih kromosomskih nepravilnosti, kar omogoča zanesljivo dolgoročno gojenje. Te celice imajo mezenhimski fenotip, za katerega je značilno izražanje vimentina in odsotnost epitelijskih označevalcev, kot je citokeratin, kar je skladno z njihovim stromalnim izvorom. Poleg tega celična linija izkazuje omejeno, vendar opazno sposobnost mezenhimske diferenciacije, vključno s sposobnostjo diferenciacije v mišične celice pod ustreznimi pogoji. Zaradi tega je Wilms1 neprecenljivo orodje za raziskovanje molekularnih mehanizmov mezenhimske diferenciacije in njene deregulacije v patogenezi Wilmsovega tumorja.

Wilms1 se uporablja tudi za preučevanje stanja aktivacije ključnih signalnih poti, ki sodelujejo pri napredovanju tumorjev. Proteomske analize so pokazale, da celice Wilms1 kažejo fosforilacijo in aktivacijo več receptorskih tirozinskih kinaz, vključno z EGFR in PDGFRβ, ter signalne poti MAPK, ki so v nadaljevanju verige. Te ugotovitve poudarjajo pomen celične linije Wilms1 pri raziskovanju ciljno usmerjenih terapevtskih pristopov za tumor Wilms, in sicer z ugotavljanjem vloge teh poti pri preživetju, proliferaciji in diferenciaciji rakavih celic.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo