Wilms11

Celična linija Wilms11 je bila pridobljena iz primarnega Wilmsovega tumorja (nefroblastoma) pri pediatričnem bolniku. Za razliko od številnih drugih celičnih linij tumorjev Wilms je za Wilms11 značilna prisotnost divjega tipa WT1, kar pomeni, da ne vsebuje mutacij v genu WT1, ki so običajno povezane s tumorji Wilms z agresivnejšim ali stromalnim fenotipom. Vendar je tumor Wilms11 izkazoval znatno stromalno diferenciacijo z velikimi območji rabdomiomatozne diferenciacije, kar kaže na mezenhimske elemente v tumorju. Prisotnost divjega tipa WT1 v kombinaciji s stromalno diferenciacijo tumorja zagotavlja edinstven model za razumevanje biologije tumorjev Wilms v primerih, ko mutacije WT1 niso prisotne.

Genetske študije Wilms11 so pokazale, da ima ta celična linija tumorsko specifično mutacijo v genu CTNNB1, ki kodira β-katenin, ki ima ključno vlogo v signalni poti Wnt. Pri Wilms11 ta mutacija vpliva na serin 45, ključno mesto fosforilacije, ki sodeluje pri razgradnji β-Catenina. Mutacija CTNNB1 povzroči stabilizacijo β-katenina, kar vodi do njegovega kopičenja in konstitutivne aktivacije signalne poti Wnt, ki je gonilo celične proliferacije in tumorigeneze. Zaradi tega je Wilms11 pomemben model za preučevanje medsebojnega vpliva med signalizacijo Wnt in razvojem Wilmsovega tumorja, zlasti v primerih, ko WT1 ostane nedotaknjen.

Proteomske analize Wilms11 so razkrile aktivacijo več receptorskih tirozinskih kinaz (RTK), vključno s PDGFRβ in AXL, ki sodelujejo pri spodbujanju rasti in preživetja tumorskih celic. V celicah Wilms11 se aktivirajo tudi signalne poti, kot sta MAPK in PI3K/AKT, kar prispeva k njihovemu tumorogenemu obnašanju. Sposobnost celic Wilms11 za mezenhimsko diferenciacijo, zlasti rabdomiomatozno diferenciacijo, poudarja njihov potencial kot modela za preučevanje mezenhimskih komponent tumorja Wilms. Na splošno je Wilms11 dragoceno orodje za raziskovanje molekularnih mehanizmov, ki spodbujajo nastanek Wilmsovega tumorja v odsotnosti mutacij WT1, vendar v okviru aktivacije poti Wnt.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo