Wilms11

Wilms11 šūnu līnija tika iegūta no primārā Wilms audzēja (nefroblastomas) pediatriskā pacientā. Atšķirībā no daudzām citām Vilmsa audzēja šūnu līnijām Wilms11 ir raksturīga savvaļas tipa WT1 klātbūtne, t. i., tajā nav WT1 gēna mutāciju, kas parasti ir saistītas ar agresīvākiem vai stromas fenotipiem raksturīgiem Vilmsa audzējiem. Tomēr Wilms11 audzējs uzrādīja ievērojamu stromālo diferenciāciju ar lieliem rabdomiomatozas diferenciācijas apgabaliem, kas liecina par mezenhimāliem elementiem audzējā. Savvaļas tipa WT1 klātbūtne kopā ar audzēja stromālo diferenciāciju nodrošina unikālu modeli, lai izprastu Vilmsa audzēja bioloģiju gadījumos, kad WT1 mutācijas nav konstatētas.

Wilms11 ģenētiskie pētījumi liecina, ka šai šūnu līnijai ir audzējam raksturīga mutācija CTNNB1 gēnā, kas kodē β-katenīnu, kuram ir izšķiroša nozīme Wnt signalizācijas ceļā. Wilms11 gadījumā šī mutācija ietekmē 45. serīnu, kas ir galvenā fosforilēšanas vieta β-Catenin noārdīšanās procesā. CTNNB1 mutācijas rezultātā β-Catenin stabilizējas, kā rezultātā tas uzkrājas un konstitīvi aktivizējas Wnt signalizācijas ceļš, kas ir šūnu proliferācijas un audzēju rašanās virzītājspēks. Tas padara Wilms11 par svarīgu modeli, lai pētītu mijiedarbību starp Wnt signalizāciju un Wilms audzēja attīstību, īpaši gadījumos, kad WT1 paliek neskarts.

Wilms11 proteomikas analīzes ir atklājušas vairāku receptoru tirozīna kināžu (RTK), tostarp PDGFRβ un AXL, aktivizāciju, kas veicina audzēja šūnu augšanu un izdzīvošanu. Wilms11 šūnās ir aktivizēti arī tādi pakārtotie signalizācijas ceļi kā MAPK un PI3K/AKT ceļi, kas veicina to audzēja uzvedību. Wilms11 šūnu spēja veikt mezenhimālo diferenciāciju, jo īpaši rabdomiomatozo diferenciāciju, izceļ to potenciālu kā modeļa Vilmsa audzēja mezenhimālo komponentu izpētei. Kopumā Wilms11 kalpo kā vērtīgs instruments, lai pētītu molekulāros mehānismus, kas nosaka Wilms audzēju rašanos, ja nav WT1 mutāciju, bet Wnt ceļa aktivizācijas kontekstā.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu