Wilms11
Cell line · Product number 300420
The Wilms11 cell line was derived from a primary Wilms tumor (nephroblastoma) in a pediatric patient. Unlike many other Wilms tumor cell lines, Wilms11 is...
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01General information
- Description
Wilms11 细胞系来源于一名儿科患者的原发性 Wilms 肿瘤(肾母细胞瘤)。与许多其他 Wilms 肿瘤细胞系不同,Wilms11 的特点是存在野生型 WT1,这意味着它不携带 WT1 基因突变,而 WT1 基因突变通常与表现出更具侵袭性或基质表型的 Wilms 肿瘤有关。然而,Wilms11 肿瘤表现出明显的基质分化,有大面积的横纹肌分化,表明肿瘤内有间充质成分。野生型 WT1 的存在加上肿瘤的基质分化,为了解 WT1 突变缺失情况下 Wilms 肿瘤的生物学特性提供了一个独特的模型。
对 Wilms11 的遗传学研究表明,该细胞系的 CTNNB1 基因携带肿瘤特异性突变,该基因编码 β-Catenin,而 β-Catenin 在 Wnt 信号通路中起着至关重要的作用。在 Wilms11 中,这一突变影响到丝氨酸 45,而丝氨酸 45 是β-Catenin 降解过程中的一个关键磷酸化位点。CTNNB1 突变导致β-Catenin 稳定,导致其积累和 Wnt 信号通路的持续激活,而 Wnt 信号通路是细胞增殖和肿瘤发生的驱动因素。这使得 Wilms11 成为研究 Wnt 信号与 Wilms 肿瘤发生之间相互作用的重要模型,尤其是在 WT1 保持不变的情况下。
对 Wilms11 的蛋白质组学分析表明,包括 PDGFRβ 和 AXL 在内的多种受体酪氨酸激酶(RTK)被激活,它们参与驱动肿瘤细胞的生长和存活。Wilms11细胞的下游信号通路,如MAPK和PI3K/AKT通路也被激活,从而导致其致瘤行为。Wilms11 细胞能够进行间质分化,尤其是横纹肌分化,这突显了它们作为研究 Wilms 肿瘤间质成分模型的潜力。总之,Wilms11 是研究在没有 WT1 突变但 Wnt 通路激活的情况下驱动 Wilms 肿瘤发生的分子机制的宝贵工具。
- Tissue
- 肾脏
- Disease
- Wilms 肿瘤
- Applications
- 体外细胞培养模型。生化研究
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 纺锤形
- Cell type
- Wilms 细胞
04Identifiers
- Citation
- Wilms11(Cytion 目录号 300420)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_A5SM
05Expression and susceptibility
- Mutational profile
- WT1 突变状态:同基因 WT1 c.901c>T,p.R301x。LOH: .CTNNB1 突变状态:野生型
06Handling and culture
- Culture medium
- MSCGM 试剂盒(龙沙公司提供)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Donor age
- 22 个月
- Ethnicity
- 高加索人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时,必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时,必须穿戴适当的防护手套和防护服,并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险,因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion,我们保证产品的质量和活力。 我们保证,从我们的工厂发货后 60 天内,我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息,请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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