Wilms11

La lignée cellulaire Wilms11 a été dérivée d’une tumeur de Wilms (néphroblastome) primaire chez un enfant. Contrairement à de nombreuses autres lignées cellulaires de tumeurs de Wilms, Wilms11 se caractérise par la présence du gène WT1 de type sauvage, ce qui signifie qu’elle ne présente pas de mutations dans le gène WT1, généralement associées à des tumeurs de Wilms présentant des phénotypes plus agressifs ou stromaux. Cependant, la tumeur Wilms11 présentait une différenciation stromale importante, avec de vastes zones de différenciation rhabdomyomateuse, indiquant la présence d’éléments mésenchymateux au sein de la tumeur. La présence du gène WT1 de type sauvage, combinée à la différenciation stromale de la tumeur, offre un modèle unique pour comprendre la biologie de la tumeur de Wilms dans les cas où aucune mutation du gène WT1 n’est présente.

Des études génétiques sur Wilms11 ont montré que cette lignée cellulaire porte une mutation spécifique à la tumeur dans le gène CTNNB1, qui code pour la β-caténine et joue un rôle crucial dans la voie de signalisation Wnt. Dans Wilms11, cette mutation affecte la sérine 45, un site de phosphorylation clé impliqué dans la dégradation de la β-caténine. La mutation du gène CTNNB1 entraîne la stabilisation de la β-caténine, ce qui conduit à son accumulation et à l’activation constitutive de la voie de signalisation Wnt, un facteur déterminant de la prolifération cellulaire et de la tumorigenèse. Cela fait de Wilms11 un modèle important pour l’étude de l’interaction entre la signalisation Wnt et le développement de la tumeur de Wilms, en particulier dans les cas où le gène WT1 reste intact.

Les analyses protéomiques de Wilms11 ont révélé l’activation de plusieurs récepteurs de tyrosine kinase (RTK), notamment le PDGFRβ et l’AXL, qui contribuent à la croissance et à la survie des cellules tumorales. Des voies de signalisation en aval, telles que les voies MAPK et PI3K/AKT, sont également activées dans les cellules Wilms11, ce qui contribue à leur comportement tumorigène. La capacité des cellules Wilms11 à subir une différenciation mésenchymateuse, en particulier une différenciation rhabdomyomateuse, met en évidence leur potentiel en tant que modèle pour l’étude des composantes mésenchymateuses de la tumeur de Wilms. Dans l’ensemble, Wilms11 constitue un outil précieux pour l’étude des mécanismes moléculaires qui régissent la tumorigenèse de la tumeur de Wilms en l’absence de mutations du gène WT1, mais dans le contexte d’une activation de la voie Wnt.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.