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Wilms11
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Wilms11

Cell line · 제품 번호 300420

Wilms11 세포주는 소아 환자의 원발성 윌름스 종양(신장모세포종)에서 유래되었습니다. 다른 많은 윌름스 종양 세포주와 달리, Wilms11은...

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롯
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01일반 정보

설명

윌름스11 세포주는 소아 환자의 원발성 윌름스 종양(신모세포종)에서 유래했습니다. 다른 많은 Wilms 종양 세포주와 달리 Wilms11은 야생형 WT1이 존재한다는 특징이 있는데, 이는 일반적으로 더 공격적이거나 기질 표현형을 나타내는 Wilms 종양과 관련된 WT1 유전자에 돌연변이가 없음을 의미합니다. 그러나 Wilms11 종양은 종양 내 중간엽 요소를 나타내는 횡문근종 분화 영역이 넓어 상당한 기질 분화를 나타냈습니다. 종양의 기질 분화와 결합된 야생형 WT1의 존재는 WT1 돌연변이가 없는 경우 윌름스 종양 생물학을 이해하는 데 고유한 모델을 제공합니다.

Wilms11의 유전자 연구에 따르면 이 세포주는 Wnt 신호 경로에서 중요한 역할을 하는 β-카테닌을 암호화하는 유전자 CTNNB1에 종양 특이적 돌연변이를 가지고 있는 것으로 나타났습니다. Wilms11에서 이 돌연변이는 β-카테닌 분해에 관여하는 주요 인산화 부위인 세린 45에 영향을 미칩니다. CTNNB1 돌연변이는 β-카테닌의 안정화를 초래하여 세포 증식 및 종양 형성의 원동력인 Wnt 신호 경로의 축적과 구성적 활성화로 이어집니다. 따라서 Wilms11은 특히 WT1이 손상되지 않은 경우 Wnt 신호와 Wilms 종양 발생 사이의 상호 작용을 연구하는 데 중요한 모델이 됩니다.

Wilms11의 단백질체 분석을 통해 종양 세포 성장과 생존에 관여하는 PDGFRβ 및 AXL을 비롯한 여러 수용체 티로신 키나아제(RTK)의 활성화가 밝혀졌습니다. MAPK 및 PI3K/AKT 경로와 같은 다운스트림 신호 경로도 Wilms11 세포에서 활성화되어 종양 유발 행동에 기여합니다. 중간엽 분화, 특히 횡문근 분화를 겪는 Wilms11 세포의 능력은 Wilms 종양의 중간엽 성분을 연구하는 모델로서의 잠재력을 강조합니다. 전반적으로 Wilms11은 WT1 돌연변이가 없지만 Wnt 경로 활성화의 맥락에서 Wilms 종양 형성을 유도하는 분자 메커니즘을 조사하는 데 유용한 도구로 사용됩니다.

티슈
신장
질병
윌름스 종양
응용 분야
체외 세포 배양 모델. 생화학 연구

02분류

생물체
인간
성
남성
성장 특성
준수자
생물안전 등급
1

03특징

형태학
스핀들 모양
세포 유형
윌름스 세포

04식별자

인용
Wilms11(사이티온 카탈로그 번호 300420)
NCBI 세금 식별번호
9606
셀로사우루스
CVCL_A5SM

05발현 및 감수성

돌연변이 프로파일
WT1 돌연변이 상태: 동형접합 WT1 c.901c>T, p.R301x. LOH: . CTNNB1 돌연변이 상태: 야생형

06취급 및 배양

배지
MSCGM 키트(Lonza 제공)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

기증자 연령
22개월
민족
백인