Wilms11

Клітинна лінія Wilms11 була отримана з первинної пухлини Вільмса (нефробластоми) у педіатричного пацієнта. На відміну від багатьох інших клітинних ліній пухлини Вільмса, Wilms11 характеризується наявністю дикого типу WT1, тобто не містить мутацій в гені WT1, що зазвичай асоціюється з більш агресивним або стромальним фенотипом пухлини Вільмса. Однак пухлина Вільмса11 демонструвала значну стромальну диференціацію з великими ділянками рабдоміоматозного диференціювання, що свідчить про наявність мезенхімальних елементів у пухлині. Наявність дикого типу WT1 у поєднанні зі стромальною диференціацією пухлини забезпечує унікальну модель для розуміння біології пухлини Вільмса у випадках, коли мутації WT1 відсутні.

Генетичні дослідження Wilms11 показали, що ця клітинна лінія несе пухлиноспецифічну мутацію в CTNNB1, гені, що кодує β-катенін, який відіграє вирішальну роль у сигнальному шляху Wnt. У Wilms11 ця мутація впливає на серин 45, ключовий сайт фосфорилювання, що бере участь у деградації β-катеніну. Мутація CTNNB1 призводить до стабілізації β-катеніну, що призводить до його накопичення та конститутивної активації сигнального шляху Wnt, драйвера клітинної проліферації та пухлиноутворення. Це робить Wilms11 важливою моделлю для вивчення взаємодії між сигнальним шляхом Wnt і розвитком пухлини Вільмса, особливо у випадках, коли WT1 залишається інтактним.

Протеомний аналіз Wilms11 виявив активацію декількох рецепторних тирозинкіназ (RTK), включаючи PDGFRβ і AXL, які беруть участь у стимулюванні росту та виживання пухлинних клітин. Наступні сигнальні шляхи, такі як MAPK і PI3K/AKT, також активуються в клітинах Wilms11, сприяючи їх пухлинній поведінці. Здатність клітин Wilms11 до мезенхімального диференціювання, зокрема рабдоміоматозного, підкреслює їх потенціал як моделі для вивчення мезенхімальних компонентів пухлини Вільмса. В цілому, Wilms11 слугує цінним інструментом для дослідження молекулярних механізмів, які керують пухлиноутворенням Вільмса за відсутності мутацій WT1, але в контексті активації шляху Wnt.

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>