Wilms10M

Клітинну лінію Wilms10M було отримано з метастатичного легеневого вузла пацієнта з пухлиною Вільмса (нефробластомою). Як і її первинний пухлинний аналог, Wilms10T, клітинна лінія Wilms10M характеризується гомозиготною делецією гена WT1, що призводить до повної відсутності білка WT1. WT1 необхідний для нормального розвитку нирок, і його делеція асоціюється з більш агресивною поведінкою пухлини, особливо в умовах метастазування. Крім того, клітини Wilms10M демонструють втрату гетерозиготності (LOH) в області хромосоми 11p15, яка включає ген IGF2, що додатково сприяє розвитку злоякісних властивостей цих клітин.

Клітини Wilms10M підтримують стабільний каріотип без значних хромосомних перебудов, окрім специфічної делеції області WT1. Ця клітинна лінія, отримана з метастатичної тканини, є особливо цінною для вивчення молекулярних механізмів метастазування пухлини Вільмса. Клітини мають мезенхімальні характеристики, експресують такі маркери, як віментин, але не мають епітеліальних маркерів, таких як цитокератин, що свідчить про їх походження зі стромального компонента пухлини.

Дослідження Wilms10M було зосереджено на сигнальних шляхах, які активні в цих метастатичних клітинах. Протеомні аналізи продемонстрували активацію декількох рецепторних тирозинкіназ (RTK), включаючи IGF1R, PDGFRβ і AXL, які беруть участь у сприянні виживанню, проліферації та метастатичному потенціалу клітин. Також активуються наступні сигнальні шляхи MAPK і PI3K/AKT, які відіграють ключову роль у підтримці інвазивного та метастатичного фенотипу клітин Wilms10M. З огляду на своє метастатичне походження, клітини Wilms10M є важливою моделлю для розуміння молекулярних подій, що лежать в основі метастазування пухлини Вільмса, а також для розробки цілеспрямованих терапевтичних стратегій проти метастатичного захворювання.

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>