Wilms10M

La linea cellulare Wilms10M è stata ottenuta da un nodulo polmonare metastatico di un paziente affetto da tumore di Wilms (nefroblastoma). Come la sua controparte tumorale primaria, Wilms10T, la linea cellulare Wilms10M è caratterizzata da una delezione omozigote del gene WT1, con conseguente assenza completa della proteina WT1. WT1 è essenziale per il normale sviluppo del rene e la sua delezione è associata a un comportamento tumorale più aggressivo, in particolare in caso di metastasi. Inoltre, le cellule Wilms10M presentano una perdita di eterozigosi (LOH) nella regione cromosomica 11p15, che include il gene IGF2, contribuendo ulteriormente alle proprietà maligne di queste cellule.

Le cellule Wilms10M mantengono un cariotipo stabile senza riarrangiamenti cromosomici importanti, a parte la delezione specifica della regione WT1. Questa linea cellulare, derivata da tessuto metastatico, è particolarmente preziosa per studiare i meccanismi molecolari che guidano la metastasi nel tumore di Wilms. Le cellule presentano caratteristiche mesenchimali, esprimendo marcatori come la vimentina, mentre mancano di marcatori epiteliali come la citocheratina, il che indica la loro origine dalla componente stromale del tumore.

La ricerca su Wilms10M si è concentrata sulle vie di segnalazione attive in queste cellule metastatiche. Le analisi proteomiche hanno dimostrato l'attivazione di diverse tirosin-chinasi recettoriali (RTK), tra cui IGF1R, PDGFRβ e AXL, coinvolte nella promozione della sopravvivenza, della proliferazione e del potenziale metastatico delle cellule. Vengono attivate anche le vie di segnalazione MAPK e PI3K/AKT, che svolgono un ruolo chiave nel mantenere il fenotipo invasivo e metastatico delle cellule Wilms10M. Data la sua origine metastatica, Wilms10M è un modello essenziale per comprendere gli eventi molecolari alla base della metastasi del tumore di Wilms e per sviluppare strategie terapeutiche mirate contro la malattia metastatica.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia