Wilms10M

สายเซลล์ Wilms10M ถูกสร้างขึ้นจากก้อนเนื้อปอดที่แพร่กระจายของผู้ป่วยที่มีเนื้องอก Wilms (เนื้องอกไต) เช่นเดียวกับเนื้องอกต้นกำเนิด Wilms10T สายเซลล์ Wilms10M มีลักษณะเด่นคือการลบยีน WT1 แบบโฮโมไซกัส ส่งผลให้ขาดโปรตีน WT1 อย่างสมบูรณ์WT1 มีความสำคัญต่อการพัฒนาไตปกติ และการลบออกของยีนนี้มีความเกี่ยวข้องกับพฤติกรรมของเนื้องอกที่รุนแรงมากขึ้น โดยเฉพาะในสภาพแวดล้อมที่มีการแพร่กระจาย นอกจากนี้ เซลล์ Wilms10M ยังแสดงการสูญเสียความหลากหลายทางพันธุกรรม (LOH) ในบริเวณโครโมโซม 11p15 ซึ่งรวมถึงยีน IGF2 ซึ่งมีส่วนช่วยเพิ่มคุณสมบัติที่เป็นมะเร็งของเซลล์เหล่านี้

เซลล์ Wilms10M รักษา karyotype ที่เสถียรโดยไม่มีการจัดเรียงโครโมโซมที่สำคัญยกเว้นการลบเฉพาะของบริเวณ WT1 สายเซลล์นี้ซึ่งได้มาจากเนื้อเยื่อที่แพร่กระจาย มีคุณค่าอย่างยิ่งในการศึกษาเชิงโมเลกุลที่ขับเคลื่อนการแพร่กระจายในเนื้องอก Wilms เซลล์เหล่านี้แสดงลักษณะของ mesenchymal โดยแสดงเครื่องหมายเช่น vimentin ในขณะที่ขาดเครื่องหมาย epithelial เช่น cytokeratin ซึ่งบ่งบอกถึงต้นกำเนิดจากองค์ประกอบ stroma ของเนื้องอก

การวิจัยเกี่ยวกับ Wilms10M ได้มุ่งเน้นไปที่เส้นทางการส่งสัญญาณซึ่งมีการทำงานในเซลล์ที่มีการแพร่กระจายเหล่านี้ การวิเคราะห์โปรตีโอมิกส์ได้แสดงให้เห็นถึงการกระตุ้นของตัวรับไทรโอซีนไคเนสหลายชนิด (RTKs) รวมถึง IGF1R, PDGFRβ, และ AXL ซึ่งเกี่ยวข้องกับการส่งเสริมการอยู่รอดของเซลล์ การเพิ่มจำนวน และการแพร่กระจายของเซลล์เส้นทางสัญญาณ MAPK และ PI3K/AKT ที่อยู่ปลายน้ำยังถูกกระตุ้นด้วยเช่นกัน โดยมีบทบาทสำคัญในการรักษาลักษณะการรุกรานและการแพร่กระจายของเซลล์ Wilms10M เนื่องจากมีต้นกำเนิดจากการแพร่กระจาย Wilms10M จึงเป็นแบบจำลองที่สำคัญสำหรับการทำความเข้าใจเหตุการณ์ระดับโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังการแพร่กระจายของเนื้องอก Wilms และสำหรับการพัฒนากลยุทธ์การรักษาที่มุ่งเป้าต่อโรคที่แพร่กระจาย

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.