Wilms10M

Dòng tế bào Wilms10M được thiết lập từ một khối u phổi di căn của bệnh nhân mắc u Wilms (nephroblastoma). Giống như dòng tế bào u nguyên phát Wilms10T, dòng tế bào Wilms10M có đặc điểm là sự thiếu hụt đồng hợp tử của gen WT1, dẫn đến sự vắng mặt hoàn toàn của protein WT1. WT1 là gen thiết yếu cho sự phát triển bình thường của thận, và sự mất đoạn của nó liên quan đến hành vi ung thư ác tính hơn, đặc biệt trong các trường hợp di căn. Ngoài ra, các tế bào Wilms10M còn có sự mất dị hợp tử (LOH) ở vùng nhiễm sắc thể 11p15, bao gồm gen IGF2, góp phần vào các đặc tính ác tính của các tế bào này.

Tế bào Wilms10M duy trì một karyotype ổn định mà không có sự sắp xếp lại nhiễm sắc thể lớn nào ngoài sự mất đoạn cụ thể của vùng WT1. Dòng tế bào này, được phân lập từ mô di căn, đặc biệt có giá trị trong việc nghiên cứu các cơ chế phân tử thúc đẩy di căn trong u Wilms. Các tế bào này có đặc điểm trung mô, biểu hiện các dấu hiệu như vimentin, trong khi thiếu các dấu hiệu biểu mô như cytokeratin, điều này cho thấy nguồn gốc của chúng từ thành phần mô liên kết của khối u.

Nghiên cứu về Wilms10M tập trung vào các con đường tín hiệu hoạt động trong các tế bào di căn này. Phân tích proteomics đã chỉ ra sự hoạt hóa của một số thụ thể tyrosine kinase (RTKs), bao gồm IGF1R, PDGFRβ và AXL, tham gia vào việc thúc đẩy sự sống còn, tăng sinh và tiềm năng di căn của tế bào. Các con đường tín hiệu MAPK và PI3K/AKT ở hạ lưu cũng được kích hoạt, đóng vai trò quan trọng trong việc duy trì biểu hiện xâm lấn và di căn của các tế bào Wilms10M. Do nguồn gốc di căn của nó, Wilms10M là một mô hình quan trọng để hiểu các sự kiện phân tử cơ bản của quá trình di căn u Wilms và để phát triển các chiến lược điều trị nhắm mục tiêu chống lại bệnh di căn.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.