Wilms10M

Wilms10M šūnu līnija tika iegūta no metastātiska plaušu mezgliņa pacientam ar Wilms audzēju (nefroblastomu). Wilms10M šūnu līnijai, tāpat kā tās primārajam audzējam, Wilms10T, ir raksturīga homozigotiska WT1 gēna delecija, kā rezultātā WT1 proteīns pilnībā nav sastopams. WT1 ir būtisks normālai nieru attīstībai, un tā izdzēšana ir saistīta ar agresīvāku audzēja uzvedību, jo īpaši metastātiskā vidē. Turklāt Wilms10M šūnām piemīt heterozigotiskuma zudums (LOH) 11p15 hromosomu apgabalā, kas ietver IGF2 gēnu, kas vēl vairāk veicina šo šūnu ļaundabīgās īpašības.

Wilms10M šūnas saglabā stabilu kariotipu bez būtiskām hromosomu pārkārtojumiem, izņemot specifisku WT1 reģiona izdzēšanu. Šī šūnu līnija, kas iegūta no metastātiskiem audiem, ir īpaši vērtīga, lai pētītu molekulāros mehānismus, kas izraisa metastāzes Vilmsa audzējā. Šīm šūnām piemīt mezenhimālas īpašības, tās ekspresē tādus marķierus kā vimentīns, bet tām nav epitēlija marķieru, piemēram, citokeratīna, kas norāda uz to izcelsmi no audzēja stromālā komponenta.

Wilms10M pētījumos galvenā uzmanība ir pievērsta signālu ceļiem, kas ir aktīvi šajās metastātiskajās šūnās. Proteomiskās analīzes ir pierādījušas vairāku receptoru tirozīna kināžu (RTK), tostarp IGF1R, PDGFRβ un AXL, aktivizāciju, kas veicina šūnu izdzīvošanu, proliferāciju un metastātisko potenciālu. Aktivizējas arī pakārtotie MAPK un PI3K/AKT signalizācijas ceļi, kam ir būtiska nozīme Wilms10M šūnu invazīvā un metastātiskā fenotipa uzturēšanā. Ņemot vērā Wilms10M metastātisko izcelsmi, tā ir būtisks modelis, lai izprastu molekulārās norises, kas ir Wilms audzēja metastāžu pamatā, un lai izstrādātu mērķtiecīgas terapeitiskās stratēģijas metastātisku slimību ārstēšanai.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu