Wilms10M

Bunková línia Wilms10M bola vytvorená z metastatického pľúcneho uzla pacienta s Wilmsovým nádorom (nefroblastómom). Podobne ako jej primárny nádorový náprotivok Wilms10T, aj bunkovú líniu Wilms10M charakterizuje homozygotná delécia génu WT1, čo vedie k úplnej absencii proteínu WT1. WT1 je nevyhnutný pre normálny vývoj obličiek a jeho delécia sa spája s agresívnejším nádorovým správaním, najmä v metastatickom prostredí. Okrem toho bunky Wilms10M vykazujú stratu heterozygotnosti (LOH) v chromozómovej oblasti 11p15, ktorá zahŕňa gén IGF2, čo ďalej prispieva k malígnym vlastnostiam týchto buniek.

Bunky Wilms10M si zachovávajú stabilný karyotyp bez väčších chromozomálnych prestavieb okrem špecifickej delécie oblasti WT1. Táto bunková línia, odvodená z metastatického tkaniva, je obzvlášť cenná na štúdium molekulárnych mechanizmov, ktoré poháňajú metastázovanie Wilmsovho nádoru. Bunky vykazujú mezenchýmové vlastnosti, exprimujú markery ako vimentín, pričom im chýbajú epitelové markery ako cytokeratín, čo svedčí o ich pôvode zo stromálnej zložky nádoru.

Výskum Wilms10M sa zameral na signálne dráhy, ktoré sú aktívne v týchto metastatických bunkách. Proteomické analýzy preukázali aktiváciu niekoľkých receptorových tyrozínkináz (RTK) vrátane IGF1R, PDGFRβ a AXL, ktoré sa podieľajú na podpore prežívania, proliferácie a metastatického potenciálu buniek. Aktivované sú aj nadväzujúce signálne dráhy MAPK a PI3K/AKT, ktoré zohrávajú kľúčovú úlohu pri udržiavaní invazívneho a metastatického fenotypu buniek Wilms10M. Vzhľadom na svoj metastatický pôvod je Wilms10M základným modelom na pochopenie molekulárnych udalostí, ktoré sú základom metastázovania Wilmsovho nádoru, a na vývoj cielených terapeutických stratégií proti metastatickému ochoreniu.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke