Wilms10M

Die Wilms10M-Zelllinie wurde aus einem metastasierenden Lungenknoten eines Patienten mit Wilms-Tumor (Nephroblastom) hergestellt. Wie das Gegenstück zum Primärtumor, Wilms10T, ist die Wilms10M-Zelllinie durch eine homozygote Deletion des WT1-Gens gekennzeichnet, was zu einem vollständigen Fehlen des WT1-Proteins führt. WT1 ist für die normale Entwicklung der Niere unerlässlich, und seine Deletion wird mit einem aggressiveren Tumorverhalten in Verbindung gebracht, insbesondere in metastatischen Situationen. Darüber hinaus weisen Wilms10M-Zellen einen Verlust an Heterozygotie (LOH) in der chromosomalen Region 11p15 auf, in der sich das IGF2-Gen befindet, was ebenfalls zu den bösartigen Eigenschaften dieser Zellen beiträgt.

Wilms10M-Zellen weisen einen stabilen Karyotyp ohne größere chromosomale Umlagerungen auf, abgesehen von der spezifischen Deletion der WT1-Region. Diese Zelllinie, die aus metastatischem Gewebe stammt, ist besonders wertvoll für die Untersuchung der molekularen Mechanismen, die die Metastasierung bei Wilms-Tumoren vorantreiben. Die Zellen weisen mesenchymale Eigenschaften auf, indem sie Marker wie Vimentin exprimieren, während ihnen epitheliale Marker wie Zytokeratin fehlen, was auf ihre Herkunft aus der Stromakomponente des Tumors hinweist.

Die Forschung zu Wilms10M hat sich auf die Signalwege konzentriert, die in diesen metastatischen Zellen aktiv sind. Proteomanalysen haben die Aktivierung mehrerer Rezeptortyrosinkinasen (RTKs) gezeigt, darunter IGF1R, PDGFRβ und AXL, die an der Förderung des Überlebens, der Proliferation und des metastatischen Potenzials der Zellen beteiligt sind. Die nachgeschalteten MAPK- und PI3K/AKT-Signalwege werden ebenfalls aktiviert und spielen eine Schlüsselrolle bei der Aufrechterhaltung des invasiven und metastatischen Phänotyps der Wilms10M-Zellen. Aufgrund seines metastatischen Ursprungs ist Wilms10M ein wichtiges Modell für das Verständnis der molekularen Vorgänge, die der Metastasierung von Wilms-Tumoren zugrunde liegen, und für die Entwicklung gezielter therapeutischer Strategien gegen metastatische Erkrankungen.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung