Wilms10M

Wilms10M-cellelinjen ble etablert fra en metastatisk lungeknute fra en pasient med Wilms-svulst (nefroblastom). I likhet med sin primære motpart, Wilms10T, er Wilms10M-cellelinjen karakterisert av en homozygot delesjon av WT1-genet, noe som resulterer i et fullstendig fravær av WT1-protein. WT1 er essensielt for normal nyreutvikling, og delesjonen er assosiert med mer aggressiv tumoradferd, særlig i metastaserende miljøer. I tillegg viser Wilms10M-celler tap av heterozygositet (LOH) i kromosomregion 11p15, som inkluderer IGF2-genet, noe som ytterligere bidrar til disse cellenes ondartede egenskaper.

Wilms10M-celler opprettholder en stabil karyotype uten større kromosomale rearrangementer bortsett fra den spesifikke deletjonen av WT1-regionen. Denne cellelinjen, som stammer fra metastatisk vev, er spesielt verdifull for å studere de molekylære mekanismene som driver metastasering i Wilms-svulster. Cellene har mesenkymale egenskaper og uttrykker markører som vimentin, mens de mangler epitelmarkører som cytokeratin, noe som tyder på at de stammer fra den stromale komponenten i svulsten.

Forskningen på Wilms10M har fokusert på signalveiene som er aktive i disse metastatiske cellene. Proteomanalyser har påvist aktivering av flere reseptortyrosinkinaser (RTK-er), inkludert IGF1R, PDGFRβ og AXL, som er involvert i å fremme celleoverlevelse, spredning og metastatisk potensial. De nedstrøms MAPK- og PI3K/AKT-signalveiene aktiveres også, noe som spiller en nøkkelrolle i opprettholdelsen av Wilms10M-cellenes invasive og metastatiske fenotype. På grunn av sin metastatiske opprinnelse er Wilms10M en viktig modell for å forstå de molekylære hendelsene som ligger til grunn for Wilms-svulstens metastase, og for å utvikle målrettede behandlingsstrategier mot metastatisk sykdom.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring