Wilms11

Wilms11-cellelinjen ble avledet fra en primær Wilms-svulst (nefroblastom) hos en pediatrisk pasient. I motsetning til mange andre Wilms-svulstcellelinjer er Wilms11 karakterisert ved tilstedeværelsen av villtype WT1, noe som betyr at den ikke har mutasjoner i WT1-genet, som vanligvis forbindes med Wilms-svulster som utviser mer aggressive eller stromale fenotyper. Wilms11-svulsten viste imidlertid betydelig stromal differensiering, med store områder med rabdomyomatøs differensiering, noe som tyder på mesenkymale elementer i svulsten. Tilstedeværelsen av villtype WT1, kombinert med svulstens stromale differensiering, gir en unik modell for å forstå Wilms-svulstens biologi i tilfeller der WT1-mutasjoner er fraværende.

Genetiske studier av Wilms11 har vist at denne cellelinjen bærer en tumorspesifikk mutasjon i CTNNB1, genet som koder for β-Catenin, som spiller en avgjørende rolle i Wnt-signalveien. I Wilms11 påvirker denne mutasjonen serin 45, et viktig fosforyleringssted som er involvert i nedbrytningen av β-Catenin. CTNNB1-mutasjonen fører til stabilisering av β-Catenin, noe som fører til akkumulering og konstitutiv aktivering av Wnt-signalveien, som er en drivkraft for celleproliferasjon og tumorutvikling. Dette gjør Wilms11 til en viktig modell for å studere samspillet mellom Wnt-signalering og utvikling av Wilms-svulster, spesielt i tilfeller der WT1 forblir intakt.

Proteomanalyser av Wilms11 har avdekket aktivering av flere reseptortyrosinkinaser (RTK-er), inkludert PDGFRβ og AXL, som er involvert i å drive tumorcellevekst og -overlevelse. Nedstrøms signalveier, som MAPK- og PI3K/AKT-veiene, aktiveres også i Wilms11-celler, noe som bidrar til deres tumorgeniske atferd. Wilms11-cellenes evne til å gjennomgå mesenkymal differensiering, spesielt rabdomyomatøs differensiering, fremhever deres potensial som modell for å studere de mesenkymale komponentene i Wilms-svulster. Wilms11 er et verdifullt verktøy for å undersøke de molekylære mekanismene som driver Wilms-svulstutvikling i fravær av WT1-mutasjoner, men i sammenheng med aktivering av Wnt-stien.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring