Wilms11

Cellinjen Wilms11 härrör från en primär Wilms-tumör (nefroblastom) hos en pediatrisk patient. Till skillnad från många andra cellinjer för Wilms-tumörer kännetecknas Wilms11 av förekomsten av WT1 av vildtyp, vilket innebär att den inte har mutationer i WT1-genen, som vanligtvis förknippas med Wilms-tumörer som uppvisar mer aggressiva eller stromala fenotyper. Wilms11-tumören uppvisade dock en betydande stromal differentiering, med stora områden av rhabdomyomatös differentiering, vilket tyder på mesenkymala element i tumören. Förekomsten av WT1 av vildtyp, i kombination med tumörens stromala differentiering, utgör en unik modell för att förstå Wilms-tumörens biologi i fall där WT1-mutationer saknas.

Genetiska studier av Wilms11 har visat att denna cellinje bär på en tumörspecifik mutation i CTNNB1, genen som kodar för β-Catenin, som spelar en avgörande roll i Wnt-signalvägen. I Wilms11 påverkar denna mutation serin 45, ett viktigt fosforyleringsställe som är involverat i nedbrytningen av β-Catenin. CTNNB1-mutationen resulterar i stabilisering av β-Catenin, vilket leder till ackumulering och konstitutiv aktivering av Wnt-signalvägen, en drivkraft för cellproliferation och tumörutveckling. Detta gör Wilms11 till en viktig modell för att studera samspelet mellan Wnt-signalering och utveckling av Wilms-tumörer, särskilt i de fall där WT1 förblir intakt.

Proteomiska analyser av Wilms11 har visat på aktivering av flera receptortyrosinkinaser (RTK), inklusive PDGFRβ och AXL, som är involverade i tumörcellernas tillväxt och överlevnad. Nedströms signalvägar, såsom MAPK- och PI3K/AKT-vägarna, aktiveras också i Wilms11-cellerna, vilket bidrar till deras tumörframkallande beteende. Wilms11-cellernas förmåga att genomgå mesenkymal differentiering, särskilt rhabdomyomatös differentiering, belyser deras potential som modell för att studera de mesenkymala komponenterna i Wilms tumör. Sammantaget fungerar Wilms11 som ett värdefullt verktyg för att undersöka de molekylära mekanismer som driver Wilms tumörigenes i frånvaro av WT1-mutationer men i samband med aktivering av Wnt-vägen.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring