Wilms11

La línea celular Wilms11 se derivó de un tumor de Wilms primario (nefroblastoma) en un paciente pediátrico. A diferencia de muchas otras líneas celulares de tumor de Wilms, Wilms11 se caracteriza por la presencia de WT1 de tipo salvaje, lo que significa que no presenta mutaciones en el gen WT1, el cual suele estar asociado con tumores de Wilms que exhiben fenotipos más agresivos o estromales. Sin embargo, el tumor Wilms11 presentó una diferenciación estromal significativa, con amplias áreas de diferenciación rabdomiomatosa, lo que indica la presencia de elementos mesenquimales dentro del tumor. La presencia del gen WT1 de tipo salvaje, junto con la diferenciación estromal del tumor, ofrece un modelo único para comprender la biología del tumor de Wilms en los casos en que no hay mutaciones en el gen WT1.

Los estudios genéticos de Wilms11 han demostrado que esta línea celular porta una mutación específica del tumor en el gen CTNNB1, el cual codifica la β-catenina, que desempeña un papel crucial en la vía de señalización Wnt. En Wilms11, esta mutación afecta a la serina 45, un sitio clave de fosforilación involucrado en la degradación de la β-catenina. La mutación en CTNNB1 da lugar a la estabilización de la β-catenina, lo que conduce a su acumulación y a la activación constitutiva de la vía de señalización Wnt, un factor impulsor de la proliferación celular y la tumorigénesis. Esto convierte a Wilms11 en un modelo importante para estudiar la interacción entre la señalización Wnt y el desarrollo del tumor de Wilms, particularmente en los casos en que el gen WT1 permanece intacto.

Los análisis proteómicos de Wilms11 han revelado la activación de varios receptores de tirosina quinasa (RTK), entre ellos el PDGFRβ y el AXL, que participan en el crecimiento y la supervivencia de las células tumorales. Las vías de señalización posteriores, como las vías MAPK y PI3K/AKT, también se activan en las células Wilms11, lo que contribuye a su comportamiento tumorigénico. La capacidad de las células Wilms11 para sufrir diferenciación mesenquimal, en particular diferenciación rabdomiomatosa, resalta su potencial como modelo para estudiar los componentes mesenquimales del tumor de Wilms. En general, Wilms11 sirve como una herramienta valiosa para investigar los mecanismos moleculares que impulsan la tumorigénesis de Wilms en ausencia de mutaciones en el gen WT1, pero en el contexto de la activación de la vía Wnt.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.