Wilms11

Wilms11-cellelinjen stammer fra en primær Wilms-tumor (nefroblastom) hos en pædiatrisk patient. I modsætning til mange andre Wilms-tumorcellelinjer er Wilms11 karakteriseret ved tilstedeværelsen af vildtype-WT1, hvilket betyder, at den ikke indeholder mutationer i WT1-genet, som typisk er forbundet med Wilms-tumorer, der udviser mere aggressive eller stromale fænotyper. Wilms11-tumoren udviste dog betydelig stromal differentiering med store områder af rhabdomyomatøs differentiering, hvilket tyder på mesenkymale elementer i tumoren. Tilstedeværelsen af vildtype-WT1 kombineret med tumorens stromale differentiering giver en unik model til at forstå Wilms-tumorbiologi i tilfælde, hvor WT1-mutationer er fraværende.

Genetiske undersøgelser af Wilms11 har vist, at denne cellelinje bærer en tumorspecifik mutation i CTNNB1, genet der koder for β-Catenin, som spiller en afgørende rolle i Wnt-signalvejen. I Wilms11 påvirker denne mutation serin 45, et vigtigt fosforyleringssted, der er involveret i nedbrydningen af β-Catenin. CTNNB1-mutationen resulterer i stabilisering af β-Catenin, hvilket fører til ophobning og konstitutiv aktivering af Wnt-signalvejen, som er en drivkraft for celleproliferation og tumorigenese. Det gør Wilms11 til en vigtig model til undersøgelse af samspillet mellem Wnt-signalering og Wilms-tumorudvikling, især i tilfælde, hvor WT1 forbliver intakt.

Proteomiske analyser af Wilms11 har afsløret aktivering af flere receptortyrosinkinaser (RTK'er), herunder PDGFRβ og AXL, som er involveret i at drive tumorcellevækst og -overlevelse. Downstream-signalveje, såsom MAPK- og PI3K/AKT-veje, aktiveres også i Wilms11-celler, hvilket bidrager til deres tumorigeniske adfærd. Wilms11-cellernes evne til at gennemgå mesenkymal differentiering, især rhabdomyomatøs differentiering, fremhæver deres potentiale som en model til undersøgelse af de mesenkymale komponenter i Wilms-tumor. Samlet set fungerer Wilms11 som et værdifuldt værktøj til at undersøge de molekylære mekanismer, der driver Wilms-tumorigenese i fravær af WT1-mutationer, men i forbindelse med aktivering af Wnt-vejen.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring