Wilms11

La línea celular Wilms11 procede de un tumor de Wilms primario (nefroblastoma) de un paciente pediátrico. A diferencia de muchas otras líneas celulares de tumor de Wilms, Wilms11 se caracteriza por la presencia de WT1 de tipo salvaje, lo que significa que no alberga mutaciones en el gen WT1, que suele asociarse a tumores de Wilms que presentan fenotipos más agresivos o estromales. Sin embargo, el tumor Wilms11 presentaba una diferenciación estromal significativa, con grandes áreas de diferenciación rabdomiomatosa, indicativa de elementos mesenquimales dentro del tumor. La presencia de WT1 de tipo salvaje, unida a la diferenciación estromal del tumor, proporciona un modelo único para comprender la biología del tumor de Wilms en casos en los que las mutaciones de WT1 están ausentes.

Los estudios genéticos de Wilms11 han demostrado que esta línea celular es portadora de una mutación específica del tumor en CTNNB1, el gen que codifica la β-Catenina, que desempeña un papel crucial en la vía de señalización Wnt. En Wilms11, esta mutación afecta a la serina 45, un lugar de fosforilación clave implicado en la degradación de la β-Catenina. La mutación CTNNB1 provoca la estabilización de la β-Catenina, lo que conduce a su acumulación y a la activación constitutiva de la vía de señalización Wnt, impulsora de la proliferación celular y la tumorigénesis. Esto convierte a Wilms11 en un modelo importante para estudiar la interacción entre la señalización Wnt y el desarrollo de tumores de Wilms, especialmente en los casos en los que WT1 permanece intacto.

Los análisis proteómicos de Wilms11 han revelado la activación de varios receptores tirosina quinasa (RTK), incluidos PDGFRβ y AXL, que están implicados en el crecimiento y la supervivencia de las células tumorales. Las vías de señalización descendentes, como las vías MAPK y PI3K/AKT, también se activan en las células Wilms11, contribuyendo a su comportamiento tumorigénico. La capacidad de las células Wilms11 de sufrir diferenciación mesenquimal, en particular diferenciación rabdomiomatosa, destaca su potencial como modelo para estudiar los componentes mesenquimales del tumor de Wilms. En general, Wilms11 sirve como valiosa herramienta para investigar los mecanismos moleculares que impulsan la tumorigénesis de Wilms en ausencia de mutaciones WT1 pero en el contexto de la activación de la vía Wnt.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía