Wilms10T

La línea celular Wilms10T se derivó de una muestra primaria de tumor de Wilms obtenida de un paciente con tumor de Wilms, un nefroblastoma pediátrico. Esta línea celular se caracteriza por una deleción homocigota del gen WT1, que conduce a una pérdida completa de la función WT1, un gen crítico implicado en el desarrollo renal y el mantenimiento de la diferenciación renal normal. A diferencia de muchas otras líneas celulares de tumor de Wilms, Wilms10T carece de expresión de la proteína WT1, lo que refleja las graves alteraciones genéticas presentes en este subtipo tumoral. Además, la línea celular Wilms10T presenta pérdida de heterocigosidad (LOH) en la región cromosómica 11p15, que incluye genes importantes como el IGF2, lo que contribuye aún más a sus propiedades tumorigénicas.

Las células Wilms10T tienen un cariotipo normal estable sin reordenamientos cromosómicos importantes, aparte de la deleción específica de la región WT1. Esta línea celular se ha utilizado ampliamente para estudiar los efectos de la pérdida completa de WT1 en la biología tumoral, incluido su impacto en la proliferación celular, la diferenciación y la respuesta a diversas vías de señalización. Las células conservan características mesenquimales, expresando marcadores como la vimentina, mientras que carecen de marcadores epiteliales como la citoqueratina, indicativos de su origen estromal.

Numerosas investigaciones se han centrado en las vías de señalización activas en las células Wilms10T. Los estudios proteómicos han demostrado que estas células muestran la activación de varios receptores tirosina quinasa (RTK) como IGF1R, PDGFRβ y AXL, que se sabe que impulsan la tumorigénesis. Además, las vías de señalización descendentes, incluidas las vías MAPK y PI3K/AKT, se activan en las células Wilms10T, contribuyendo a su agresivo fenotipo tumoral. La caracterización exhaustiva de Wilms10T lo convierte en un modelo valioso para investigar los fundamentos moleculares del tumor de Wilms con pérdida completa de WT1, así como para explorar posibles dianas terapéuticas en este subtipo de tumor agresivo.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía