Wilms10T

Wilms10T細胞株は、小児腎芽細胞腫であるWilms腫瘍患者から得られた原発性Wilms腫瘍サンプルに由来する。この細胞株はWT1遺伝子のホモ接合性欠失によって特徴付けられ、腎臓の発生と正常な腎分化の維持に関与する重要な遺伝子であるWT1の機能を完全に喪失している。他の多くのウィルムス腫瘍細胞株とは異なり、Wilms10TはWT1タンパク質の発現を全く欠いており、これはこの腫瘍サブタイプに存在する深刻な遺伝子変化を反映している。さらに、Wilms10T細胞株は、IGF2のような重要な遺伝子を含む11p15染色体領域でヘテロ接合性の欠損（LOH）を示し、腫瘍形成性をさらに助長している。

Wilms10T細胞は、WT1領域の特異的欠失を除けば、主要な染色体再配列のない安定した正常核型を有する。この細胞株は、細胞の増殖、分化、様々なシグナル伝達経路に対する応答への影響など、WT1の完全欠損が腫瘍生物学に及ぼす影響を研究するために広く利用されてきた。この細胞は間葉系の特徴を保持しており、ビメンチンなどのマーカーを発現する一方、間質由来を示すサイトケラチンなどの上皮性マーカーを欠く。

Wilms10T細胞で活性化されるシグナル伝達経路については、かなりの研究がなされている。プロテオミクス研究により、これらの細胞はIGF1R、PDGFRβ、AXLなどのいくつかの受容体チロシンキナーゼ（RTK）の活性化を示すことが示された。さらに、MAPK経路やPI3K/ACT経路を含む下流のシグナル伝達経路がWilms10T細胞で活性化され、その攻撃的な腫瘍表現型に寄与している。Wilms10Tの包括的な特徴づけは、WT1が完全に欠損したWilms腫瘍の分子基盤を研究する上で、またこの攻撃的な腫瘍サブタイプにおける潜在的な治療標的を探索する上で、貴重なモデルとなる。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。