Wilms10T

Garis sel Wilms10T berasal dari sampel tumor Wilms primer yang diperoleh dari pasien dengan tumor Wilms, nefroblastoma pediatrik. Garis sel ini ditandai dengan penghapusan gen WT1 yang homozigot, yang menyebabkan hilangnya fungsi WT1, gen penting yang terlibat dalam perkembangan ginjal dan pemeliharaan diferensiasi ginjal normal. Tidak seperti banyak garis sel tumor Wilms lainnya, Wilms10T tidak memiliki ekspresi protein WT1, yang mencerminkan perubahan genetik yang parah yang ada pada subtipe tumor ini. Selain itu, garis sel Wilms10T menunjukkan hilangnya heterozigositas (LOH) di daerah kromosom 11p15, yang mencakup gen-gen penting seperti IGF2, yang selanjutnya berkontribusi pada sifat tumorigeniknya.

Sel Wilms10T memiliki kariotipe normal yang stabil tanpa penataan ulang kromosom yang besar selain dari penghapusan spesifik wilayah WT1. Garis sel ini telah digunakan secara luas untuk mempelajari efek hilangnya WT1 lengkap pada biologi tumor, termasuk dampaknya pada proliferasi sel, diferensiasi, dan respons terhadap berbagai jalur pensinyalan. Sel-sel mempertahankan karakteristik mesenkim, mengekspresikan penanda seperti vimentin, sementara tidak memiliki penanda epitel seperti sitokeratin, yang menunjukkan asal usul stroma mereka.

Penelitian yang signifikan telah difokuskan pada jalur pensinyalan yang aktif dalam sel Wilms10T. Studi proteomik telah menunjukkan bahwa sel-sel ini menunjukkan aktivasi beberapa reseptor tirosin kinase (RTK) seperti IGF1R, PDGFRβ, dan AXL, yang diketahui mendorong tumorigenesis. Selain itu, jalur pensinyalan hilir, termasuk jalur MAPK dan PI3K / AKT, diaktifkan dalam sel Wilms10T, yang berkontribusi pada fenotipe tumor agresif mereka. Karakterisasi komprehensif Wilms10T menjadikannya model yang berharga untuk menyelidiki dasar-dasar molekuler tumor Wilms dengan kehilangan WT1 lengkap, serta untuk mengeksplorasi target terapeutik potensial pada subtipe tumor agresif ini.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami