Wilms10T

קו התאים Wilms10T נגזר מדגימה ראשונית של גידול וילמס שנלקחה מחולה עם גידול וילמס, סוג של נפוציטומה בילדים. קו תאים זה מאופיין במחיקה הומוזיגוטית של הגן WT1, המובילה לאובדן מוחלט של תפקוד WT1, גן קריטי המעורב בהתפתחות הכליות ובשמירה על הבחנה נורמלית של הכליות. בניגוד לקווי תאים רבים אחרים של גידול וילמס, Wilms10T חסר כל ביטוי של חלבון WT1, מה שמשקף את השינויים הגנטיים החמורים הקיימים בתת-סוג זה של הגידול. בנוסף, קו התאים Wilms10T מציג אובדן הטרוזיגוטיות (LOH) באזור הכרומוזום 11p15, הכולל גנים חשובים כמו IGF2, מה שתורם עוד יותר לתכונותיו הטומורגניות.

לתאי Wilms10T יש קריוטיפ נורמלי ויציב ללא שינויים כרומוזומליים משמעותיים, מלבד המחיקה הספציפית של אזור WT1. קו תאים זה שימש רבות לחקר ההשפעות של אובדן WT1 מוחלט על הביולוגיה של הגידול, כולל השפעתו על התרבות תאים, התמיינות ותגובה למסלולי איתות שונים. התאים שומרים על מאפיינים מזנכימליים, ומבטאים סמנים כגון וימנטין, בעוד שהם חסרים סמנים אפיתלליים כגון ציטוקראטין, המעידים על מקורם הסטרומלי.

מחקרים משמעותיים התמקדו במסלולי האיתות הפעילים בתאי Wilms10T. מחקרים פרוטאומיים הוכיחו שתאים אלה מראים הפעלה של מספר קולטני טירוזין קינאז (RTK) כגון IGF1R, PDGFRβ ו-AXL, הידועים כמניעים את התפתחות הגידול. בנוסף, מסלולי איתות במורד הזרם, כולל מסלולי MAPK ו-PI3K/AKT, מופעלים בתאי Wilms10T, ותורמים לפנוטיפ הגידול האגרסיבי שלהם. האפיון המקיף של Wilms10T הופך אותו למודל חשוב לחקר הבסיס המולקולרי של גידול וילמס עם אובדן WT1 מוחלט, וכן לחקר מטרות טיפוליות פוטנציאליות בסוג גידול אגרסיבי זה.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו