Wilms2

קו התאים Wilms2 נגזר מגידול Wilms ראשוני בחולה ילדים עם מוטציה בגן WT1. קו תאים זה מאופיין במוטציה הומוזיגוטית חסרת משמעות בגן WT1 (c.1084 C>T, p.R362X), הגורמת לייצור חלבון WT1 מקוצר ולא תפקודי. אובדן ה-WT1 התפקודי, גן חיוני להתפתחות הכליות, הוא סימן היכר של תת-סוגים מסוימים של גידול וילמס, במיוחד אלה הקשורים להבחנה מזנכמלית או סטרומלית. קו התאים Wilms2 הוא מודל משמעותי לחקר תהליכים טומורגניים המונעים על ידי אובדן WT1, במיוחד בהקשר של גידולי וילמס השומרים על מאפיינים גנטיים קריטיים אחרים.

תאי Wilms2 נושאים גם מוטציות בגן CTNNB1, המקודד ל-β-Catenin, מרכיב מרכזי במסלול האיתות Wnt. מוטציות אלה, המשפיעות באופן ספציפי על סרין 45, מובילות לייצוב ולהצטברות של β-Catenin, וכתוצאה מכך להפעלה קונסטיטוטבית של מסלול Wnt. הפעלה זו היא גורם ידוע להתרבות תאים וליצירת גידולים בגידולי וילמס, מה שהופך את Wilms2 למודל חשוב להבנת האופן שבו איתות Wnt חריג תורם להתפתחות ולהתקדמות של גידולים עם מוטציות WT1.

מבחינת הפנוטיפ, תאי Wilms2 מציגים מורפולוגיה דמוית מזנכימלית, מבטאים וימנטין וחסרים סמנים אפיתלליים כגון ציטוקראטין. זה תואם את מאפייני הסטרומה של הגידול ומדגיש את תפקידו של WT1 בוויסות מעברים מזנכימליים-אפיתלליים במהלך התפתחות הכליה. ניתוחים פרוטאומיים של Wilms2 זיהו הפעלה של מספר קולטני טירוזין קינאז (RTK), כולל PDGFRβ ו-AXL, הידועים כתומכים בהישרדות ובהתרבות של תאי הגידול. בנוסף, מסלולים במורד הזרם כגון MAPK ו-PI3K/AKT מופעלים גם הם, ותורמים עוד יותר לתכונות הממאירות של תאי Wilms2.

בסך הכל, קו התאים Wilms2 משמש ככלי חיוני לחקר המנגנונים המולקולריים של גידול וילמס המונע על ידי אובדן WT1 ואיתות Wnt חריג. המאפיינים הגנטיים והפנוטיפיים שלו מספקים פלטפורמה איתנה לחקר מטרות טיפוליות פוטנציאליות ולהבנת תפקידם של מסלולי איתות מרכזיים בפתולוגיה של גידולי וילמס עם מרכיב מזנכימלי.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו