ويلمز 2

تم اشتقاق سلالة خلايا ويلمز2 من ورم ويلمز الأولي لدى مريض أطفال مصاب بطفرة في جين WT1. ويتميز هذا الخط الخلوي بطفرة متماثلة الزيجوت في جين WT1 (ج.1084 C>T، p.R362X)، مما يؤدي إلى إنتاج بروتين WT1 مبتور وغير وظيفي. يعد فقدان بروتين WT1 الوظيفي، وهو جين ضروري لنمو الكلى، سمة مميزة لأنواع فرعية معينة من ورم ويلمز، خاصةً تلك المرتبطة بالتمايز الوسيطة أو التمايز اللحمي. ويُعد خط خلايا ويلمز2 نموذجاً هاماً لدراسة العمليات السرطانية التي يقودها فقدان الجين WT1، خاصةً في سياق أورام ويلمز التي تحتفظ بخصائص وراثية حرجة أخرى.

تحمل خلايا ويلمز2 أيضاً طفرات في جين CTNNB1 الذي يشفر β-Catenin، وهو مكون رئيسي في مسار إشارات Wnt. وتؤدي هذه الطفرات، التي تؤثر تحديدًا على سيرين 45، إلى استقرار وتراكم بيتا-كاتينين، مما يؤدي إلى التنشيط التأسيسي لمسار Wnt. ويُعد هذا التنشيط محركًا معروفًا لتكاثر الخلايا وتكوّن الأورام في ورم ويلمز، مما يجعل من ويلمز2 نموذجًا قيّمًا لفهم كيفية مساهمة إشارات Wnt الشاذة في تطور الأورام وتطورها مع طفرات WT1.

فيما يتعلق بالنمط الظاهري، تُظهر خلايا ويلمز2 مورفولوجيا تشبه الخلايا الوسيطة اللُّحمية التي تعبر عن الفيمينتين وتفتقر إلى العلامات الظهارية مثل السيتوكراتين. وهذا يتماشى مع الخصائص اللحمية للورم ويؤكد دور WT1 في تنظيم التحولات الوسيطة-الظهارية أثناء تطور الكلى. وقد حددت التحليلات البروتينية لويلمز2 تنشيط العديد من مستقبلات التيروزين كيناز (RTKs)، بما في ذلك PDGFRβ وAXL، والمعروف أنها تدعم بقاء الخلايا الورمية وتكاثرها. بالإضافة إلى ذلك، يتم أيضًا تنشيط مسارات المصب مثل MAPK وPI3K/AKT، مما يساهم بشكل أكبر في الخصائص الخبيثة لخلايا ويلمز2.

وبشكل عام، يُستخدم خط خلايا ويلمز2 كأداة أساسية لاستكشاف الآليات الجزيئية لورم ويلمز المدفوع بفقدان WT1 وإشارات Wnt الشاذة. وتوفر خصائصه الوراثية والمظهرية منصة قوية لدراسة الأهداف العلاجية المحتملة وفهم دور مسارات الإشارات الرئيسية في علم أمراض أورام ويلمز ذات المكون الوسيطي.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان