Wilms10T

تم اشتقاق سلالة خلايا ويلمز10T من عينة أولية من ورم ويلمز تم الحصول عليها من مريض مصاب بورم ويلمز، وهو ورم أرومي كلوي لدى الأطفال. ويتميز هذا الخط الخلوي بحذف متماثل الزيجوت لجين WT1، مما يؤدي إلى فقدان كامل لوظيفة WT1، وهو جين مهم في نمو الكلى والحفاظ على التمايز الكلوي الطبيعي. وعلى عكس العديد من سلالات خلايا ورم ويلمز الأخرى، يفتقر سلالة ويلمز10T إلى أي تعبير بروتيني للجين WT1، وهو ما يعكس التغيرات الجينية الحادة الموجودة في هذا النوع الفرعي من الورم. بالإضافة إلى ذلك، يُظهر خط خلايا "ويلمز10 تي" فقدان التغاير في المنطقة الكروموسومية 11p15، والتي تتضمن جينات مهمة مثل IGF2، مما يساهم في زيادة خصائصه الورمية.

تتمتع خلايا ويلمز10T بنمط نووي طبيعي مستقر مع عدم وجود إعادة ترتيب كروموسومي كبير باستثناء الحذف المحدد لمنطقة WT1. تم استخدام هذا الخط الخلوي على نطاق واسع لدراسة آثار فقدان WT1 الكامل على بيولوجيا الورم، بما في ذلك تأثيره على تكاثر الخلايا وتمايزها واستجابتها لمسارات الإشارات المختلفة. تحتفظ الخلايا بخصائص الوسيطة اللُّحْمية المتوسطة، معبرة عن علامات مثل الفيمينتين، بينما تفتقر إلى العلامات الظهارية مثل السيتوكراتين، مما يدل على أصلها اللحمي.

وقد ركزت الأبحاث الهامة على مسارات الإشارات النشطة في خلايا ويلمز10T. وقد أظهرت الدراسات البروتينية أن هذه الخلايا تُظهر تنشيط العديد من مستقبلات التيروزين كيناز (RTKs) مثل IGF1R وPDGFRβ وAXL، والتي من المعروف أنها تقود تكوّن الورم. وبالإضافة إلى ذلك، يتم تنشيط مسارات الإشارات النهائية، بما في ذلك مسارات MAPK وPI3K/AKT، في خلايا ويلمز10T، مما يساهم في النمط الظاهري العدواني للورم. إن التوصيف الشامل لخلايا ويلمز10T يجعلها نموذجاً قيماً لدراسة الأسس الجزيئية لورم ويلمز مع فقدان WT1 الكامل، وكذلك لاستكشاف الأهداف العلاجية المحتملة في هذا النوع الفرعي العدواني من الأورام.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان