Wilms10T

Wilms10T-cellelinjen ble avledet fra en primær Wilms-svulstprøve fra en pasient med Wilms-svulst, et pediatrisk nefroblastom. Denne cellelinjen kjennetegnes av en homozygot delesjon av WT1-genet, noe som fører til et fullstendig tap av WT1-funksjonen, et kritisk gen som er involvert i nyreutviklingen og opprettholdelsen av normal nyredifferensiering. I motsetning til mange andre Wilms-svulstcellelinjer mangler Wilms10T ethvert uttrykk av WT1-protein, noe som gjenspeiler de alvorlige genetiske endringene som er til stede i denne svulstsubtypen. I tillegg har Wilms10T-cellelinjen tap av heterozygoti (LOH) i kromosomregion 11p15, som omfatter viktige gener som IGF2, noe som ytterligere bidrar til dens tumorogene egenskaper.

Wilms10T-celler har en stabil normal karyotype uten større kromosomale rearrangementer, bortsett fra den spesifikke deletjonen av WT1-regionen. Denne cellelinjen har blitt brukt i stor utstrekning for å studere effekten av fullstendig WT1-tap på tumorbiologi, inkludert dens innvirkning på celleproliferasjon, differensiering og respons på ulike signalveier. Cellene har mesenkymale egenskaper og uttrykker markører som vimentin, mens de mangler epitelmarkører som cytokeratin, noe som tyder på deres stromale opprinnelse.

Betydelig forskning har fokusert på signalveiene som er aktive i Wilms10T-celler. Proteomstudier har vist at disse cellene viser aktivering av flere reseptortyrosinkinaser (RTK-er), som IGF1R, PDGFRβ og AXL, som er kjent for å drive tumorigenese. I tillegg aktiveres nedstrøms signalveier, inkludert MAPK- og PI3K/AKT-veiene, i Wilms10T-celler, noe som bidrar til deres aggressive tumorfenotype. Den omfattende karakteriseringen av Wilms10T gjør den til en verdifull modell for å undersøke de molekylære forutsetningene for Wilms-svulster med fullstendig WT1-tap, samt for å utforske potensielle terapeutiske mål i denne aggressive tumorsubtypen.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring