Wilms10T

Die Wilms10T-Zelllinie wurde aus einer primären Wilms-Tumorprobe gewonnen, die einem Patienten mit Wilms-Tumor, einem pädiatrischen Nephroblastom, entnommen wurde. Diese Zelllinie zeichnet sich durch eine homozygote Deletion des WT1-Gens aus, was zu einem vollständigen Verlust der WT1-Funktion führt, einem kritischen Gen, das an der Nierenentwicklung und der Aufrechterhaltung der normalen Nierendifferenzierung beteiligt ist. Im Gegensatz zu vielen anderen Wilms-Tumor-Zelllinien fehlt bei Wilms10T jegliche WT1-Proteinexpression, was die schweren genetischen Veränderungen dieses Tumorsubtyps widerspiegelt. Darüber hinaus weist die Wilms10T-Zelllinie einen Verlust an Heterozygotie (LOH) in der chromosomalen Region 11p15 auf, in der wichtige Gene wie IGF2 liegen, was weiter zu ihren tumorigenen Eigenschaften beiträgt.

Wilms10T-Zellen haben einen stabilen normalen Karyotyp ohne größere chromosomale Umlagerungen mit Ausnahme der spezifischen Deletion der WT1-Region. Diese Zelllinie wurde ausgiebig genutzt, um die Auswirkungen des vollständigen WT1-Verlusts auf die Tumorbiologie zu untersuchen, einschließlich der Auswirkungen auf die Zellproliferation, die Differenzierung und die Reaktion auf verschiedene Signalübertragungswege. Die Zellen behalten mesenchymale Eigenschaften und exprimieren Marker wie Vimentin, während ihnen epitheliale Marker wie Cytokeratin fehlen, was auf ihren stromalen Ursprung hinweist.

Bedeutende Forschungsarbeiten haben sich auf die Signalwege konzentriert, die in Wilms10T-Zellen aktiv sind. Proteomische Studien haben gezeigt, dass diese Zellen eine Aktivierung mehrerer Rezeptor-Tyrosinkinasen (RTKs) wie IGF1R, PDGFRβ und AXL aufweisen, die bekanntermaßen die Tumorentstehung fördern. Darüber hinaus werden in Wilms10T-Zellen nachgeschaltete Signalwege, darunter die MAPK- und PI3K/AKT-Wege, aktiviert, was zu ihrem aggressiven Tumorphänotyp beiträgt. Die umfassende Charakterisierung von Wilms10T macht sie zu einem wertvollen Modell für die Untersuchung der molekularen Grundlagen von Wilms-Tumoren mit vollständigem WT1-Verlust sowie für die Erforschung potenzieller therapeutischer Ziele bei diesem aggressiven Tumorsubtyp.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung