Wilms10T

Wilms10T ląstelių linija buvo gauta iš pirminio Vilmso naviko mėginio, gauto iš paciento, sergančio Vilmso naviku - vaikų nefroblastoma. Šiai ląstelių linijai būdinga homozigotinė WT1 geno delecija, dėl kurios visiškai prarandama WT1 funkcija, t. y. labai svarbus genas, dalyvaujantis inkstų vystymesi ir palaikantis normalią inkstų diferenciaciją. Skirtingai nuo daugelio kitų Vilmso naviko ląstelių linijų, Wilms10T neturi WT1 baltymo raiškos, o tai atspindi sunkius genetinius pakitimus, būdingus šiam naviko potipiui. Be to, Wilms10T ląstelių linija pasižymi heterozigotiškumo praradimu (LOH) 11p15 chromosomos srityje, kurioje yra tokie svarbūs genai kaip IGF2, o tai dar labiau prisideda prie jos navikinių savybių.

Wilms10T ląstelės turi stabilų normalų kariotipą be didesnių chromosomų pertvarkymų, išskyrus specifinį WT1 srities išbraukimą. Ši ląstelių linija buvo plačiai naudojama tiriant visiško WT1 praradimo poveikį naviko biologijai, įskaitant jo poveikį ląstelių proliferacijai, diferenciacijai ir atsakui į įvairius signalų kelius. Ląstelės išlaiko mezenchimines savybes, išreiškia tokius žymenis kaip vimentinas, tačiau neturi epitelinių žymenų, tokių kaip citokeratinas, o tai rodo jų stromos kilmę.

Daug dėmesio skirta Vilmso10T ląstelėse veikiančių signalų keliams tirti. Proteominiai tyrimai parodė, kad šiose ląstelėse aktyvuotos kelios receptorių tirozino kinazės (RTK), tokios kaip IGF1R, PDGFRβ ir AXL, kurios, kaip žinoma, lemia navikinį vystymąsi. Be to, Wilms10T ląstelėse suaktyvėja tolesni signaliniai keliai, įskaitant MAPK ir PI3K/AKT kelius, kurie lemia agresyvų naviko fenotipą. Dėl išsamių Wilms10T ląstelių savybių jos tampa vertingu modeliu tiriant Wilms naviko, kai visiškai prarastas WT1, molekulinius pagrindus ir galimus šio agresyvaus naviko potipio terapinius taikinius.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime